背景[1-3]
共济失调蛋白7样2抗体是一类可以特异性结合共济失调蛋白7样2的多克隆抗体，主要用于检测共济失调蛋白7样2的免疫学实验。
共济蛋白含210个氨基酸残基的蛋白质，发现于弗里德赖希(Friedreichs)共济失调症，其基因在某些患者体内发生点突变，但大多数为个内含子中出现不稳定GAA三核苷酸扩增的纯合子。
脊髓小脑性共济失调是遗传性共济失调的主要类型。其共同特征是中年发病，常染色体显性遗传和共济失调。临床表现除小脑性共济失调外，可伴有眼球运动障碍、慢眼运动、视神经萎缩、视网膜色素变性、锥体束征、锥体外系征、肌萎缩、周围神经病和痴呆等。
共济失调蛋白7样2
脊髓的前角细胞接受大脑皮质，大脑皮质下底核、小脑、前庭迷路系统，深感觉等上行下行传导束的调节与控制，使人体保持一定的姿势来恰当地完成随意运动，保持平衡，若上述部位发生病变，导致协调作用障碍，称为共济失调。共济失调主要反映小脑半球及其与对侧额叶皮质间联系的损害，但在其他部位的病变中也可能产生，如急性迷路水肿产生前庭性共济失调，同时伴发眩晕。深感觉障碍则产生感觉性的共济失调。累及四肢、躯干及咽喉肌可引起姿势、步态和语言障碍。
应用[4][5]
用于Ankfy1突变参与Charlevoix-Saguenay常染色体隐性痉挛性共济失调（ARSACS）发生及其机制研究
揭示Ankfy1突变对小鼠共济失调行为学的影响,探索共济失调发病的新机制。通过研究Ankfy1对Purkinje细胞的功能调节,揭示Purkinje细胞退行性改变在共济失调发病途径中的作用。
本研究为探索Purkinje细胞丢失的机制研究,为共济失调新药物研发提供理论依据。
方法（1）Ankfy1在C67/B6野生型小鼠中枢神经系统（CNS）的表达:利用原位杂交方法检测Ankfy1 mRNA在不同时间点野生型小鼠CNS的表达特点;利用RT-qPCR方法检测Ankfy1在成年野生型小鼠不同组织器官内的表达;利用免疫荧光方法检测Ankfy1在小脑Purkinje细胞内的表达特点;利用western blot方法检测Ankfy1在成年野生型小鼠不同组织器官内的蛋白表达并量化分析蛋白表达量。
（2）动物模型制作及行为学分析:利用基因捕获技术制作转基因小鼠动物模型;利用PCR方法进行小鼠基因型鉴定;利用western blot方法及RT-qPCR方法分别检测Ankfy1/+小鼠小脑内目的基因蛋白及mRNA的表达量;利用转棒实验、步态印迹实验分析小鼠行为学改变。
（3）Ankfy1/+小鼠组织病理学改变:利用免疫荧光方法检测小鼠小脑组织Ankfy1及Calbindin-28k的表达特点;利用H&E染色小脑组织,分析Purkinje细胞数量改变情况;利用免疫荧光方法检测野生型（WT）和Ankfy1/+小鼠的小脑、黑质及前庭神经核胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达;利用依莱铬氰染色小脑、脊髓及胼胝体的髓鞘组织,并量化分析实验组及对照组胼胝体厚度;利用RT-qPCR方法检测MBP mRNA及RORa mRNA的表达差异;利用RT-qPCR方法检测P7、P14、P21及P30小鼠的小脑中BDNF、MANF和NT-3的mRNA表达水平。
（4）体外培养Purkinje细胞进行形态学分析:体外培养Purkinje细胞,利用免疫荧光染色方法染色细胞;利用Sholl分析软件、Bonfire程序、ImageJ和NeuronStudio的NeuronJ插件及MATLAB（MathWorks）软件进行Purkinje细胞形态学分析。
参考文献
[1]The transcription factor X-box binding protein-1 in neurodegenerative diseases.Dunys J,Duplan E,Checler F.Mol Neurodegener.2014
[2]Mitochondrial permeability transition is a central coordinating event of apoptosis.Marchetti P,Castodo M,Susin SA,et al.The Journal of Experimental Medicine.1996
[3]The C.elegans cell death gene ced-3 encodes a protein similar to mammalian interleukin-1 beta-converting enzyme.Yuan J,Shaham S,Ledoux S,et al.Cell.1993
[4]Coordinated scaling of cortical and cerebellar numbers of neurons.Herculano-Houzel Suzana.Frontiers in neuroanatomy.2010
[5]丁曼.Ankfy1突变参与Charlevoix-Saguenay常染色体隐性痉挛性共济失调(ARSACS)发生及其机制研究[D].武汉大学,2017.