背景[1-3]
磷脂酰基醇蛋白聚糖-5抗体是一类可以特异性结合磷脂酰基醇蛋白聚糖-5的多克隆，主要用于检测磷脂酰基醇蛋白聚糖-5的免疫学实验。
磷脂酰基醇蛋白聚糖是带有糖基磷脂酰肌醇锚的蛋白聚糖。属硫酸乙酰肝素蛋白聚糖，由上皮细胞或纤维细胞等产生。
磷脂酰基醇蛋白聚糖-5
磷脂酰肌醇蛋白聚糖（Glypican,GPC）是一种硫酸乙酰肝素蛋白多糖,其家族由六个基因组成（GPC-1至GPC-6）。
硫酸乙酰肝素蛋白多糖（heparan sulfate proteoglycans,HSPGs）是一类由核心蛋白和（乙酰）硫酸肝素（heparan sulfate,HS）多糖链组成的蛋白多糖的总称。根据核心蛋白结构的不同，HSPGs主要包括位于细胞膜表面的磷脂酰肌醇蛋白多糖家族（glypicans,GPCs）和多配体蛋白多糖家族（syndecans,SDCs），以及位于细胞外基质中的基膜蛋白多糖（perlecan/HSPG2）、XVIII型胶原和集聚蛋白多糖（agrin）。
GPCs家族包括六个成员：GPC1、GPC2、GPC3、GPC4、GPC5、GPC6；SDCs家族包括四个成员：SDC1、SDC2、SDC3、SDC4。现阶段研究热点多集中在GPC-3和GPC-1上。GPC-3既可作为细胞信号通路的调节剂参与生物学过程,也可作为肿瘤学指标用于检测肝癌等恶性肿瘤。而GPC-1在早期胰腺癌患者中高表达,其诊断早期胰腺癌的特异度和敏感度均达到100%,是一种理想的肿瘤早期标志物。研究发现GPC5基因的遗传多态性与肺腺癌的发生密切相关。GPC5（glypican-5,磷脂酰肌醇蛋白聚糖5）可能是一种潜在的肺癌转移抑制基因。
应用[4][5]
用于GPC5-生长因子信号通路抑制前列腺癌进展机制的初步研究
筛选出前列腺癌中与GPC5相互作用的生长因子/受体配体成员,并初步探索他们之间的相互作用对调节肿瘤进展的潜在机制。
方法:1.应用CO-IP技术和质谱分析技术,在前列腺癌细胞中筛选出与GPC5相互作用的生长因子。
2. 应用免疫荧光共聚焦技术,检测前列腺癌细胞中GPC5和其靶蛋白在细胞亚结构内的分布。
- 应用免疫共沉淀技术提取GPC5-靶蛋白免疫复合物,后行蛋白印迹,验证GPC5与靶蛋白的相互作用。
- 应用脂质体辅助质粒DNA转染技术,建立GPC5异常表达的前列腺癌细胞系。
- 应用western blot技术,检测前列腺癌细胞GPC5异常表达后,细胞内其靶蛋白含量的变化。
结果:1.以GPC5为诱饵蛋白的免疫共沉淀复合物中共检测出三种生长因子:HDGF、IGF2BP1、GRB2,其中HDGF为三个样品中均含有的生长因子,且其蛋白分值较高。
2. 免疫荧光共聚焦结果显示,GPC5和HDGF在细胞浆内分布有广泛重叠区域。
- 以GPC5为诱饵蛋白的免疫共沉淀复合物中检测到HDGF的蛋白印迹,同时以HDGF为诱饵蛋白的免疫共沉淀复合物中也检测到GPC5的蛋白印迹。
- 建立了稳转的GPC5过表达前列腺癌PC3细胞系。
5.GPC5过表达后,前列腺癌PC3细胞内HDGF含量减少而其下游蛋白PI3-K及PAI-1含量增加。
参考文献
[1]miR-195 Targets HDGF to inhibit proliferation and invasion of NSCLC cells[J].Haizhou Guo,Weihao Li,Tianliang Zheng,Zhangsuo Liu.Tumor Biology.2014(9)
[2]HDGF and ADAM9 are novel molecular staging biomarkers,prognostic biomarkers and predictive biomarkers for adjuvant chemotherapy in surgically resected stage I non-small cell lung cancer[J].Jun Zhang,Ning Chen,Juan Qi,Baosen Zhou,Xueshan Qiu.Journal of Cancer Research and Clinical Oncology.2014(8)
[3]miR-141 suppresses proliferation and motility of gastric cancer cells by targeting HDGF[J].Bitao Chen,Tao Huang,Jun Jiang,Lei Lv,Hongxing Li,Shitao Xia.Molecular and Cellular Biochemistry.2014(1-2)
[4]High Nuclear Expression of HDGF Correlates with Disease Progression and Poor Prognosis in Human Endometrial Carcinoma[J].Lijing Wang,Qingping Jiang,Shengni Hua,Mengyang Zhao,Qiangyun Wu,Qiaofen Fu,Weiyi Fang,Suiqun Guo,Chao Hung Hung.Disease Markers.2014
[5]张晓会.GPC5-生长因子信号通路抑制前列腺癌进展机制的初步研究[D].天津医科大学,2015.