背景及概述[1][2]
马度米星，maduramicin 又名马杜拉霉素，商品名加福，熔点165-167℃。最初从美国业利桑那州附近的土壤中分离出的微生物发酵而产生的，其钱盐具有抗球虫活性。其为白色结晶粉末，不溶于水，可溶于大部分有机溶剂。属单糖昔聚醚类离子载体型抗牛素，对于堆型、布氏、巨型、和缓、变位、柔嫩以及毒害艾美耳球虫均有效，对若干革兰氏阳性菌也有效。
效价检测[3]
目前，抗生素生产领域关于马度米星发酵液的效价检测，都采用基于体积的分光光度法，此方法步采用标准移液器移取一定体积的样品，在检测过程中由于发酵液有泡沫，需要加入消泡剂进行预先消泡处理；同时发酵液中有时存在代谢产物结晶或原辅料形成的大颗粒物质，而该分光光度法效价检测的起始步骤是用移液器或吸管量取一定体积的发酵液进行浸提，加入消泡剂后的发酵液不仅存在均匀问题，而且发酵液中存在的大颗粒物质或大颗粒的代谢产物结晶，会导致用标准移液工具移液时，大颗粒物质不能吸入，或者大颗粒物质吸入过多，均会造成较大的检测偏差。
基于体积的分光光度法测定效价不仅受发酵液物理性状、发酵液温度、外界温度、人员操作差异等影响较大，而且该分光光度法检测过程中发酵液预处理需用有机溶剂正丁醇进行预先消泡，由此不仅增加了检测成本和检测时间，并且对环境造成了一定污染。针对上述马度米星发酵液效价的基于体积的分光光度法检测存在的缺陷，本发明提供一种马度米星发酵液效价的检测方法。本发明检测法是一种基于重量的分光光度法，操作方便、数据精确，并且节能减排。
CN201110142472.7采用的技术方案是：
a、首先将1mL标准移液枪的枪头口径进行扩大处理，扩大处理后的1mL移液枪枪头口径是1mL标准移液枪枪头口径的3～5倍，用处理后的1mL移液枪枪头移取未经消泡处理的马度米星发酵液，并用电子天平称取1.0g，将称取的马度米星发酵液放入容量瓶中，然后在容量瓶中加入1～2 mL的无水甲醇，摇动容量瓶使发酵液与无水甲醇混合均匀，然后再加入适量无水甲醇混合均匀，加入适量无水甲醇后无水甲醇的总加入量占容量瓶体积的85～90%，将混合均匀后的混合液进行超声波浸提8～12min或静止放置；
b、浸提或静止后向容量瓶中加入无水甲醇进行定容至容量瓶的刻度线，将定容后的混合液进行过滤，过滤后得到滤液；
c、用标准移液管移取1mL步骤b过滤后得到的滤液和2mL香草醛溶液放入10 mL棕色容量瓶中，然后加入5～6mL的无水甲醇，摇匀后得到待测液；
d、用标准移液管移取1mL马度米星标准溶液、2mL香草醛溶液放入另外一支10mL棕色容量瓶中，然后加入5～6mL的无水甲醇，摇匀后得到标准液；
e、在另一10mL棕色容量瓶中加入2mL香草醛溶液和5～6mL的无水甲醇，摇匀后得到参比液，参比液作为分光光度计校零溶液；
f、将步骤c、d、e分别制作的待测液、标准液和参比液放于68～72℃的水浴锅中水浴加热22～28min，水浴加热后分别取出冷却至室温，冷却后分别加入无水甲醇进行定容至10mL棕色容量瓶的刻度线；
g、将步骤f处理后的待测液、标准液和参比液利用分光光度计分别测其吸光度，最后根据效价公式进行效价计算。
本发明的积极有益效果：
1、采用基于重量的分光光度法检测马度米星发酵液的效价，该方法操作简单、数据精确、节约时间、减少排污，通过本发明技术方案能够达到精确、快速检测抗生素马度米星发酵液效价的目的。本发明检测方法操作简单、节约检测时间，在抗生素发酵企业均可使用。
2、采用本发明技术方案检测马度米星发酵液的效价，不用对马度米星发酵液采用有机溶剂正丁醇进行消泡处理，不仅避免了外来物质导致发酵液不均一的缺陷，并且不会因为采用有机溶剂正丁醇对环境造成污染；由此降低了发酵液效价的检测成本和检测时间。因此，本发明具有一定的经济效益和社会效益。
3、本发明技术方案中对标准移液枪的枪头口径进行了扩大处理，由此可将含有大颗粒的马度米星发酵液均匀移入容量瓶，从而克服了由于大颗粒物质导致的小口移液枪不能将均匀的发酵液移入容量瓶的缺陷。
4、本发明检测方法可有效缩短劳动时间、提高检测精度、节能减排，并且可有效解决发酵液泡沫大小不一、温度不一致的问题。
应用 [2]
马度米星可用于制备马度米星铵预混剂
现有马度米星铵预混剂或固体分散体的制备方法，均是马度米星铵原料药与载体混合，或溶解于有机溶剂中再喷混到载体上，生产过程中消耗大量有机溶媒(每吨预混剂需要消耗30-50kg乙酸乙酯、30-50kg苯甲醇)，生产成本高，存在安全隐患，同时生产过程产生抗生素菌渣(每吨预混剂产生约200-300kg抗生素菌渣)及结晶母液废物(每吨预混剂产生约10-20kg母液废物)等危险固废，环境污染严重。CN201010198220.1提供一种不使用有机溶媒、污染小、生产安全、生产成本低的马度米星铵预混剂的制备方法。
实施例1：马度米星铵预混剂的湿法混合制备方法，下面以成品中马度米星有效成分质量含量1％为例，进行具体说明。参见表1、表2。
先制备马度米星发酵液：将马度米星产生菌接入种子罐，分级扩大培养，每级培养40-72h，按6-20％的接种率接入发酵罐，发酵液∶空气＝1∶0.6～1的体积比通入空气，发酵温度控制在31-33℃，搅拌转速120-140转/分，根据糖、pH值、菌体形态补料，补入糖、氮(营养成分)、氨水(pH调节剂)、消沫剂等，培养7-10天，完成发酵，使每升发酵液含马度米星10-20g。
取马度米星铵发酵液1000L，每L发酵液含马度米星15g。用氨水调pH至8-10，加入30kg硅藻土助滤剂，用隔膜压滤机压滤，控制压榨压力为1.2MPa，压榨后得到滤饼180kg，将滤饼粉碎，过20目筛，然后进行沸腾床干燥，进风温度为120-140℃，出风温度为30-70℃，得到菌丝体干燥品(即干滤饼)77kg，其中马度米星含量为18.50％。
将菌丝体干燥品粉碎，与1235kg二水硫酸钙、10kg CMC(羧甲基纤维素钠)、水250kg混合均匀，形成混合料，进行湿法造粒，过24-100目筛，干燥时采用高效沸腾床干燥，进风温度为100-120℃，出风温度为30-60℃，干燥后水分含量要求为10％以下，实际得到1315kg成品颗粒预混剂，经检测，成品中马度米星质量含量为1.02％。产品的检测指标见表2。
本发明的积极有益效果：
(1)本发明所得马度米星铵预混剂产品经检测，产品含量、均匀度达到兽药典质量标准要求，符合出口标准，产品质量达到规定要求。
(2)本发明是将含马度米星的发酵液进行过滤，滤饼干燥后粉碎加载体，进行干法或湿法造粒。生产过程不使用有机溶媒，也不产生母液及抗生素菌渣等危险固废，生产安全性大，同时减少对环境的污染和后期治理成本。
(3)本发明和传统方法相比，减少了马度米星铵提取精制时的结晶母液及发酵菌体中马度米星的损失，使生产成本降低。本发明投资少，具有较好的经济和社会效益。
主要参考资料
[1] 化学化工大辞典（上）
[2] CN201010198220.1 马度米星铵预混剂的制备方法
[3]CN201110142472.7 马度米星发酵液效价的检测方法