背景[1-3]
还原型谷胱甘肽+巯基测定试剂盒可测动物血清、血浆、组织以及全血、红细胞、培养细胞、培养液中的谷胱甘肽(GSH)的含量。
谷胱甘肽（GSH）是一种低分子清除剂，它可清除O2-、H2O2、LOOH。谷胱甘肽是谷氨酸、甘氨酸和半胱氨酸组成的一种三肽，是组织中主要的非蛋白质的巯基化合物，并且是GSH—PX和GST两种酶类的底物，为这二种酶分解氢过氧化物所必需，它并且能稳定含巯基的酶和防止血红蛋白及其它辅因子受氧化损伤。
还原型谷胱甘肽+巯基测定试剂盒
最近还证明GSH也参与使维生素E恢复到还原态的作用，缺乏或耗竭GSH会促使许多化学物质或环境因素产生中毒作用或加重其中毒作用，这可能与增加氧化损伤有关，因而GSH的量的多少是衡量机体抗氧化能力大小的重要因素。
产品优点如下：
1、操作简便：全程约20分钟，可测96例左右样本。
2、稳定性好：试剂盒2～8℃至少存放6个月；呈色稳定，显色后1小时吸光度不变。
3、再现性好：批内CV=1.3%，批间CV=4.36%。
4、回收试验：X=99.5%。
5、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
6、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产等，效果均佳。
应用[4][5]
用于可食植物种子中还原型谷胱甘肽（GSH）和蛋白巯基（P-SH）含量的测定
选用的衍生化试剂是DTNB（5,5’-二硫双-2-硝基苯甲酸）,因其对巯基具有选择性,可以与其发生定量衍生化反应。用含过量DTNB的提取液,利用细胞破壁和衍生化同时进行的前处理方式,分别用HPLC法、光谱法实时检测了可食植物种子中GSH与蛋白巯基（P-SH）含量,并从中筛选出了五种富含GSH和蛋白巯基的可食植物种子。
通过高效液相色谱法测定结果发现,金花葵、西州蜜、黄蛋子、伊丽莎白瓜、苦瓜中含较丰富的GSH和蛋白巯基（P-SH）,其中金花葵籽中GSH和P-SH的巯基含量测定结果分别为1.1057μmol/g（GSH）和2.9835μmol/g（P-SH）,西州蜜籽中GSH和P-SH的巯基含量测定结果分别为0.6441μmol/g和5.3751μmol/g,黄蛋子籽中GSH和P-SH的巯基含量测定结果分别为0.7551μmol/g和4.2532μmol/g,伊丽莎白瓜籽中GSH和P-SH的巯基含量测定结果分别为1.0318μmol/g和5.1724μmol/g。
苦瓜籽中虽然没有检测到GSH等小分子巯基化合物,但含相对丰富的蛋白巯基（P-SH）,测定结果为4.0596μmol/g。
高效液相色谱法（HPLC）测定方法的回收率在99.46%-101.28%之间,GSH和P-SH测定检测限分别为0.0937μmol/g和0.1394μmol/g,基本满足准确测定的要求。其中,还对各样品进行了对应的荧光光谱法和紫外光谱法的测定,发现荧光光谱法测定（GSH）的含量和紫外光谱法测定总巯基（-SH）含量的结果基本和色谱测定结果相吻合。
但是,其中金花葵籽色谱测定总巯基含量与紫外-可见分光光度法测定的结果相差较大,金花葵籽中含有大量的黄酮类物质,故对其进行了干扰实验。
通过干扰实验的结果可知,在光谱法测定中大量的黄酮类可能会对结果产生一定影响,导致总疏基的含量测定结果偏高,但是在色谱中加入的干扰物质并没有影响谷胱甘肽以及总巯基含量的测定结果。
参考文献
[1]Characteristics of antioxidant activity and composition of pumpkin seed oils in 12 cultivars[J].Agnieszka Nawirska-Olszańska,Agnieszka Kita,Anita Biesiada,Anna Sokó?-??towska,Alicja Z.Kucharska.Food Chemistry.2013(1-4)
[2]Glutathione transporters[J].Anand K.Bachhawat,Anil Thakur,Jaspreet Kaur,M.Zulkifli.BBA-General Subjects.2012
[3]Glutathione catalysis and the reaction mechanisms of glutathione-dependent enzymes[J].Marcel Deponte.BBA-General Subjects.2012
[4]Antioxidant metabolism of grapefruit infected with Xanthomonas axonopodis pv.citri[J].Naveen Kumar,Robert C.Ebel,Pamela D.Roberts.Environmental and Experimental Botany.2010(1)
[5]应译娴.可食植物种子中还原型谷胱甘肽（GSH）和蛋白巯基（P-SH）含量的测定[D].延边大学,2018.