背景[1-3]
核心蛋白聚糖抗体是一类可以特异性结合核心蛋白聚糖的多克隆抗体,主要用于体外检测核心蛋白聚糖的免疫学实验。
蛋白聚糖是高度糖基化的蛋白质。蛋白聚糖的基本单位由“核心蛋白”组成,该蛋白具有一个或多个共价连接的糖胺聚糖(GAG)链。连接点是一个丝氨酸残基,其糖胺聚糖通过四糖桥连接(例如硫酸软骨素-中,GlcA-半乳糖-Gal-的Xyl-蛋白质)。Ser残基通常为-Ser-Gly-X-Gly-序列(其中X可以是除脯氨酸外的任何氨基酸残基),尽管并非每个具有此序列的蛋白质都具有附着的糖胺聚糖。链是长的线性碳水化合物聚合物,由于存在硫酸根和糖醛酸基团,在生理条件下带负电荷。蛋白聚糖存在于结缔组织中。
核心蛋白聚糖
蛋白聚糖是动物细胞外基质(存在于生物体细胞之间的“填充”物质)的主要成分。它们在这里与其他蛋白聚糖,透明质酸和纤维基质蛋白(例如胶原蛋白)形成大型复合物。蛋白聚糖和胶原蛋白的结合形成软骨,这是一个坚固的组织,通常被大量水合(主要是由于蛋白聚糖的糖胺聚糖链中带负电的硫酸盐)。它们还参与结合阳离子(例如钠、钾和钙)和水,还可以调节分子在基质中的移动。证据还表明它们可以影响基质中蛋白质和信号分子的活性和稳定性。蛋白聚糖的个别功能可以归因于蛋白质核心或附着的GAG链。通过产生有助于承受高压的水合凝胶,它们还可以用作润滑剂。
核心蛋白聚糖(Decorin)为蛋白多糖,含有一个核心蛋白和一个单链氨基多糖,含糖链和去掉糖链后的核心蛋白两者均具有同样的生物学活性。
应用[4][5]
核心蛋白聚糖抗体用于核心蛋白聚糖对皮肤创伤再生和瘢痕愈合中胶原纤维装配的影响
正常真皮组织中胶原纤维是有序的结构,由胶原蛋白分子高度有序的组装构成。如果胶原蛋白排列、组装和相互连接异常,则形成结构异常的胶原纤维支架,在创伤愈合后则表现为瘢痕形成。核心蛋白聚糖(DCN)对真皮创伤再生和瘢痕愈合中胶原纤维装配影响的研究国内很少。本研究通过建立兔耳皮肤创伤再生修复和瘢痕愈合一体化模型,于创面愈合过程在创周分别注射生理盐水(NS),核心蛋白聚糖(DCN)及核心蛋白聚糖抗体(DCN抗体)。
1. 动态观察并比较创面愈合过程中不同分组及不同深浅的组织形态学差异。
2. 观察创面愈合过程中,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白在浅层和深层创面的表达差异。
3. 探讨核心蛋白聚糖对创面愈合过程中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响。
4. 分析胶原纤维在浅层创面和深层创面愈合过程中的排列的差异,以及核心蛋白聚糖对其结构的影响。为进一步研究皮肤再生修复和瘢痕愈合提供形态学依据。
方法:1.50只日本大耳白兔,按性别、年龄、体重相近的大白兔分配出25对,然后将每一对分别分配到不同的两组中,分别为DCN组和DCN抗体组,每组25只,组内设空白对照,视为正常对照(NS)组。于耳腹做大小为10.0mmx10.0mm由浅至深的斜行创面。伤后当日起,左耳创周以30G针头注射浓度为5.0μg/ml的DCN(DCN组)或浓度为10.0μg/ml的DCN抗体(DCN抗体组),每次0.1ml,隔日一次,直至创面愈合;右耳注射等量生理盐水作为对照(NS组),方法同上。所有创面均以无菌辅料包扎并卷耳固定。分别于伤后0天、4天、8天、12天及30天大体观察和用标尺测量创面大小变化,并拍照存档以便后期统计数据。比较各组平均愈合时间和观察创面形态学改变。
2.应用HE染色、免疫组化和计算机图像处理法检测日本大耳白兔耳腹侧皮肤创伤模型外用DCN和DCN抗体前后,深浅创面愈合过程中的组织形态结构变化和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达差异。
3.利用扫描电镜技术观测胶原纤维在深浅创面愈合过程中的变化规律,以及DCN对其结构的影响。
参考文献
[1]Effects of decorin proteoglycan on fibrillogenesis,ultrastructure,and mechanics of type I collagen gels[J].Shawn P.Reese,Clayton J.Underwood,Jeffrey A.Weiss.Matrix Biology.2013
[2]Extracellular matrix molecules implicated in hypertrophic and keloid scarring[J].G.P.Sidgwick,A.Bayat.Journal of the European Academy of Dermatology and Venereology.2012(2)
[3]The Effect of Combined Steroid and Calcium Channel Blocker Injection on Human Hypertrophic Scars in Animal Model:A New Strategy for the Treatment of Hypertrophic Scars[J].JUI‐YUNGYANG,CHUN‐YUANHUANG.Dermatologic Surgery.2010(12)
[4]Collagen fibril organization in the pregnant endometrium of decorin‐deficient mice[J].Juliane C.T.Sanches,Carolyn J.P.Jones,John D.Aplin,Renato V.Iozzo,Telma M.T.Zorn,Sergio F.Oliveira.Journal of Anatomy.2009(1)
[5]齐德清.核心蛋白聚糖对皮肤创伤再生和瘢痕愈合中胶原纤维装配的影响[D].兰州大学,2015.