背景[1-3]
人类原巨核细胞型白血病细胞该细胞于1988年建系；源于一名64岁患有急性粒细胞白血病（AMLM7）的男性的骨髓；对多种细胞因子有反应。
人类原巨核细胞型白血病细胞
人类原巨核细胞型白血病细胞培养步骤：
1）复苏人类原巨核细胞型白血病细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL*培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）人类原巨核细胞型白血病细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的*培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，*脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
3）人类原巨核细胞型白血病细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，进行离心收集，1000RPM条件下离心8-10分钟，去除上清，按冻存数量加入血清及DMSO，冻存比例为90%FBS+10%DMSO。
应用[4][5]
人类原巨核细胞型白血病细胞可以用于CD9/CD11b/HLA-DR组合在APL诊断中的意义及一例全髓白血病临床及生物学特点分析
分析急性早幼粒白血病(acute promyelocytic leukemic，APL)患者的免疫表型特点，寻找能够诊断APL的敏感性和特异性较高的抗体组合，为利用流式细胞术对APL患者进行早期、及时、准确诊断及其微小残留病变(minimal residual disease，MRD)的监测提供理论和实验依据。
方法：回顾性分析2010年9月2012年12月确诊的92例APL患者的免疫学和和分子生物学结果；同时随机选取20例非APL-AML患者作为对照，针对不同的抗体和抗体组合在APL和非APL-AML中的表达情况进行统计学分析，探索高敏感性和特异性的诊断抗体组合。
结果:(1)分子生物学分析：其中79例患者进行了PML/RRAa融合基因检测，显示78例阳性，阳性率达99%，其中L型50例(64%)、S型25例(32%)、V型3例(4%)。
(2) 免疫学分析：SSC/CD45设门，92例初诊APL中，高侧向角散射(side scatter,SSC)者75例(82%)，低SSC者14例(15%)，其他类型3例(3%)；表达CD9(87/92;95%)，CD33(92/92;100%)，CD13(90/92;98%),CD33>CD13(89/92;97%)，CD117(33/92;36%)，CD64(84/92;91%)，CD38(89/92;97%)，cMPO(92/92;100%)；部分APL表达CD15(22/92;24%)，不表达HLA-DR(0/92;0)，CD11b(6/92;7%)，CD34(9/92;10%)，CD14(0/92;0)，CD56(9/92;10%)。
(3) CD9/CD11b/HLA-DR抗体组合在APL诊断中的敏感性为90%，特异性95%。HLA-DR/CD34/CD117抗体组合的敏感性为68%，特异性为85%。CD11b/HLA-DR组合的敏感性为92%，特异性为70%。抗体组合间有统计学差异(p<0.05)。
结论：(1)大部分患者SSC高，APL基因型以L型为主，S型次之，V型较少见。
(2) APL免疫表型特点为稳定表达CD9，CD13，CD33(CD33>CD13)，CD64，CD38，cMPO；部分表达：CD34，CD117，CD16，CD10，CD2；不表达：CD14，CD15，CD11b，CD4，HLA-DR，CD56，cCD79a，cCD3。
(3) CD9/CD11b/HLA-DR抗体组合在诊断APL时，具有较高的敏感性和特异性，可作为诊断APL和监测其MRD的抗体组合。
加深对全髓白血病的临床及生物学特点认识，减少全髓白血病的误诊。
方法：以2012年7月确诊的1例全髓白血病患者为研究对象，结合文献复习总结该病临床及生物学特点。
结果：临床表现类似于急性髓系白血病；血象进行性减少；骨髓象增生活跃，原粒细胞Ⅰ+Ⅱ型占10.0%(NEC26.9%)，红系占40.8%，原巨核细胞+幼巨核细胞占27.5%；免疫分型显示粒系、单核系、巨核系、红系都有；FISH可检测到+8、-7/7q-；给予CAG(Acla20mg dl-7,Ara-c25mg dl-14,G-CSF200ug dl-14)治疗后第15天出现严重的肺部真菌感染，后好转。一个疗程后,骨髓象达到完全缓解。结论：全髓白血病为少见类型白血病，病变常累及骨髓粒、红、巨系统，常有染色体异常改变，易发生严重并发性感染。
参考文献
[1]Acute panmyelosis with myelofibrosis with EVI1 amplification[J]..Cancer Genetics,2012(5)
[2]Prospective study of a therapeutic regimen with all‐trans retinoic acid and anthracyclines in combination of cytarabine in children with acute promyelocytic leukaemia:the Japanese childhood acute myeloid leukaemia cooperative study[J].MasueImaizumi;AkioTawa;RyojiHanada;MasahiroTsuchida;KenTabuchi;HisatoKigasawa;RyojiKobayashi;AkiraMorimoto;HidekiNakayama;KazukoHamamoto;KazukoKudo;HiromasaYabe;KeizoHoribe;ShigeruTsuchiya;IchiroTsukimoto.British Journal of Haematology,2010(1)
[3]Clinical and Biological Significance of CD56 Antigen Expression in Acute Promyelocytic Leukemia[J].Shigeki Ito;;Yoji Ishida;;Tatsuo Oyake;;Mamiko Satoh;;Yusei AOKI;;Shugo Kowata;;Toshiyuki Uchiyama;;Sanae Enomoto;;Takeshi Sugawara;;Hideharu Numaoka;;Keijiro Suzuki;;Kazunori Murai.Leukemia&Lymphoma,2004(9)
[4]Rapid diagnosis of acute promyelocytic leukemia(PML):applicability of flow cytometry and PML protein immunofluorescence[J].Matthew J.Cullen;;Stephen J.Richards;;Sheila J.M.O'Connor;;Helen Dickinson;;Carol Sharpe;;David M.Swirsky;;Roger Owen.Cancer Genetics and Cytogenetics,2004(2)
[5]任方刚.CD9/CD11b/HLA-DR组合在APL诊断中的意义及一例全髓白血病临床及生物学特点分析[D].山西医科大学,2013.