背景[1-3]
NCI-H23源于一位51岁患有非小细胞肺癌黑人男性患者的治疗前的肿瘤组织，表达C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erbB、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras、N-ras RNAs；NCI-H23细胞携带K-ras 12突变；p53基因246位密码子突变ATC→ATG；表达PDGF A和B链的异源mRNA；表达TGFα、TGFβ和EGFR；角蛋白5、8和18阳性，波形蛋白阳性，神经丝蛋白阴性，左旋多巴脱氢酶阴性；据报道，NCI-H23细胞在软琼脂中形成克隆的效率为9.7%。
NCI-H23
NCI-H23细胞培养步骤
一．人非小细胞肺癌细胞（NCI-H23）培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基；优质胎牛血清，10%；+1%Glutamax+1%Sodium Pyruvate，双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．NCI-H23细胞处理：
1）复苏NCI-H23细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）NCI-H23细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁NCI-H23细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将NCI-H23细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）NCI-H23细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
1，NCI-H23细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2，4min 1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3，将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
应用[4][5]
NCI-H23可以用于Wnt/β-catenin信号通路对非小细胞肺癌NCI-H23细胞干性的调控作用
探讨Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对非小细胞肺癌NCI-H23细胞干性的调控作用。
方法：以非小细胞肺癌NCI-H23细胞为对象,以糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)抑制剂(CHIR-99021)和β-catenin siRNA为干预剂,分别采用噻唑蓝比色法、体外干细胞成球培养、划痕实验及免疫印迹法检测其增殖能力、体外成球能力和迁移能力方面的改变。
结果：CHIR-99021作用24 h后NCI-H23细胞的增殖能力、干细胞成球率均明显提升,与对照组的差异均有统计学意义(P<0.05),划痕愈合时间缩短。CHIR-999021干预后的NCI-H23细胞、NCI-H23干细胞中,GSK-3β磷酸化显著降低,增殖细胞核抗原、CD133、乙醛脱氢酶1A1、Nanog、基质金属蛋白酶-2表达增加。β-catenin siRNA沉默β-catenin后NCI-H23中CD133、乙醛脱氢酶1A1和Nanog表达减少,干细胞成球率也较对照组降低(P<0.05)。
结论：Wnt/β-catenin通路参与了非小细胞肺癌NCI-H23细胞干性调节,这对于非小细胞肺癌的防治有一定价值。
参考文献
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[3]WNT signaling determines tumorigenicity and function of ESC-derived retinal progenitors[J].Cui,Lu;;Guan,Yuan;;Qu,Zepeng;;Zhang,Jingfa;;Liao,Bing;;Ma,Bo;;Qian,Jiang;;Li,Dangsheng;;Li,Weiye;;Xu,Guo-Tong;;Jin,Ying.Journal of Clinical Investigation,2013(4)
[4]Wnt/β-Catenin Signaling Regulates Telomerase in Stem Cells and Cancer Cells[J].Katrin Hoffmeyer;;Angelo Raggioli;;Stefan Rudloff;;Roman Anton;;Andreas Hierholzer;;Ignacio Del Valle;;Kerstin Hein;;Riana Vogt;;Rolf Kemler.Science,2012(6088)
[5]赵智丽,韩雅莉.Wnt/β-catenin信号通路对非小细胞肺癌NCI-H23细胞干性的调控作用[J].临床肿瘤学杂志,2015,20(07):583-587.