2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐,英文名为ABTS diammonium salt,常温常压下为淡绿色粉末固体。2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐是一种生物活性分子,其是一种辣根过氧化物酶 (HRP) 的底物,辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP),是临床检验试剂中的常用酶,该物质不但广泛用于多个生化检测项目,也广泛运用于免疫类(ELISA)试剂盒。作为一种生物化学试剂,2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐常用于测定包括血清在内的不同溶液中的葡萄糖浓度,在生物化学基础研究有一定的应用。
图1 2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐的性状图
应用
2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐是辣根过氧化物酶 (HRP) 的底物,辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)活性高,稳定,分子量小,纯酶容易制备,所以最常用。HRP广泛分布于植物界,辣根中含量高,它是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多个同工酶组成,分子量为40,000,等电点为pH3~9,酶催化的最适pH因供氢体不同而稍有差异,但多在pH5左右。酶溶于水和58%以下饱和度硫酸铵溶液。HRP的辅基和酶蛋白吸收光谱分别为403nm和275nm,一般以OD403nm /OD275nm的比值RZ(德文Reinheit Zahl)表示酶的纯度。高纯度的酶RZ值应在3.0左右(最高可达3.4)。RZ值越小,非酶蛋白就越多。2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐也是一种适于ELISA(酶联免疫吸附测定)步骤的过氧化物酶基质,这一基质产生可溶的绿色终产物,并可以利用分光光度计在405nm处观测到。2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐也用作ELISA(酶联免疫吸附分析)的底物。在食品工业中,2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐可用来测定不同食品中的抗氧化能力。此外,该生化试剂还是检测游离氯的光谱试剂。[1]
参考文献
[1] Meng, Shuaiqi; et al, Journal of Biobased Materials and Bioenergy (2019), 13(1), 79-85.