背景[1-3]
DMS79人小细胞肺癌细胞系是一种来自人类小细胞肺癌组织中分离出来的癌细胞系。这种细胞系在实验室中被广泛用于研究小细胞肺癌的发生、发展和治疗。
DMS79人小细胞肺癌细胞系具有以下特点：
形态特征：DMS79细胞呈圆形或椭圆形，大小不一。它们通常在体外培养时形成单层或多层细胞结构。
生长特性：DMS79细胞生长迅速，可以在体外持续传代。它们的增殖速度受到生长因子、细胞密度和其他环境因素的影响。
分子特征：DMS79细胞表达多种与小细胞肺癌相关的分子标志物，如神经元特异性烯醇化酶(NSE)、甲状腺转录因子-1(TTF-1)等。这些标志物有助于研究人员了解肿瘤的生物学特性和寻找潜在的治疗靶点。
药物敏感性：DMS79细胞对多种化疗药物具有不同程度的敏感性，这为临床试验提供了基础数据。此外，研究人员还可以利用这些细胞来评估新药物的安全性和有效性。
DMS79人小细胞肺癌细胞系
DMS79人小细胞肺癌细胞系培养操作
1)复苏DMS79人小细胞肺癌细胞系：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2)NCI-H647人非小细胞肺癌贴壁细胞系细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c、按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：2比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)DMS79人小细胞肺癌细胞系冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
应用[4-5]
DMS79人小细胞肺癌细胞系可以用于JQ1与ABT-263协同治疗N-Myc扩增的小细胞肺癌的研究
小细胞肺癌是一种预后极差的恶性肿瘤。抗凋亡蛋白Bcl-2的过表达经常在小细胞肺癌中发生,这使其成为潜在的治疗靶点。以前的研究表明,靶向Bcl-2的抑制剂ABT-263对小细胞肺癌的抑制作用有限。
在本研究中,我们首次发现共抑制N-Myc和Bcl-2在MYCN扩增的小细胞肺癌中具有很强的协同抗肿瘤作用。我们发现BET抑制剂JQ1能抑制MYCN扩增的DMS79人小细胞肺癌细胞系N-Myc蛋白的表达。JQ1对N-Myc的抑制作用诱导MYCN扩增的小细胞肺癌凋亡蛋白Bim的表达。此外,JQ1诱导Bim上调使MYCN扩增的DMS79人小细胞肺癌细胞系对ABT-263更加敏感,同时我们通过siRNA敲低Bim的实验证明了JQ1/ABT-263的协同抑制是通过Bim蛋白上调发挥的。在MYCN扩增的小细胞肺癌中,JQ1/ABT-263共同处理可以显著降低Bim/Bcl-2的相互作用并抑制Bim与Mcl-1的相互作用。
重要的是,JQ1/ABT-263可以协同抑制MYCN扩增的小细胞肺癌异种移植模型中肿瘤的生长。我们的研究表明JQ1/ABT-263是一种新型针对MYCN扩增小细胞肺癌的有效靶向治疗策略。
参考文献
[1]Bromodomain and hedgehog pathway targets in small cell lung cancer.Gurmeet Kaur;;Russell A.Reinhart;;Anne Monks;;David Evans;;Joel Morris;;Eric Polley;;Beverly A.Teicher.Cancer Letters,2016
[2]Exploitation of the Apoptosis-Primed State of MYCN-Amplified Neuroblastoma to Develop a Potent and Specific Targeted Therapy Combination.Jungoh Ham;;Carlotta Costa;;Renata Sano;;Timothy L.Lochmann;;Erin M.Sennott;;Neha U.Patel;;Anahita Dastur;;Maria Gomez-Caraballo;;Kateryna Krytska;;Aaron N.Hata;;Konstantinos V.Floros;;Mark T.Hughes;;Charles T.Jakubik;;Daniel A.R.Heisey;;Justin T.Ferrell;;Molly L.Bristol;;Ryan J.March;;Craig Yates;;Mark A.Hicks;;Wataru Nakajima;;Madhu Gowda;;Brad E.Windle;;Mikhail G.Dozmorov;;Mathew J.Garnett;;Ultan McDermott;;Hisashi Harada;;Shirley M.Taylor;;Iain M.Morgan;;Cyril H.Benes;;Jeffrey A.Engel.Cancer Cell,2016
[3]JQ1,a small molecule inhibitor of BRD4,suppresses cell growth andinvasion in oral squamous cell carcinoma.Limei Wang;;Xiuyin Wu;;Ping Huang;;Zhijun Lv;;Yuping Qi;;Xiujuan Wei;;Pishan Yang;;Fenghe Zhang.Oncology Reports,2016
[4]Combination with vorinostat overcomes ABT-263(navitoclax)resistance of small cell lung cancer.Wataru Nakajima;;Kanika Sharma;;Mark A.Hicks;;Ngoc Le;;Rikiara Brown;;Geoffrey W.Krystal;;Hisashi Harada.Cancer Biology&Therapy,2016
[5]王伙刚.JQ1与ABT-263协同治疗N-Myc扩增的小细胞肺癌的研究[D].中国科学技术大学,2018.