背景[1-3]
兽类嗜衣原体PCR试剂盒是一种专门用于检测兽类嗜衣原体的体外诊断试剂。它采用了聚合酶链式反应（PCR）技术，能够在短时间内快速、准确地检测出兽类嗜衣原体。
兽类嗜衣原体PCR试剂盒的主要成分包括PCR反应液、DNA模板、引物、酶等。其中，PCR反应液是PCR反应的基础，包含PCR反应所需的各种成分，如缓冲液、离子、酶等。DNA模板是含有兽类嗜衣原体特异性基因序列的DNA片段，用于扩增出特异性片段。引物是一段与DNA模板特异性结合的短序列，用于启动PCR反应。酶是热稳定的DNA聚合酶，用于催化DNA合成。
兽类嗜衣原体PCR试剂盒
使用兽类嗜衣原体PCR试剂盒时，需要将DNA模板、引物和PCR反应液混合后进行PCR反应。在适宜的温度和条件下，引物与DNA模板特异性结合，并通过酶的催化进行DNA合成，最终得到大量的特异性DNA片段。通过凝胶电泳等技术对这些片段进行检测和分析，可以确定是否存在兽类嗜衣原体。
兽类嗜衣原体PCR试剂盒具有高灵敏度、高特异性和高可靠性等特点，适用于对感染疾病的诊断，如兽类嗜衣原体感染。同时，它也可以用于研究兽类嗜衣原体的基因组结构和功能，为进一步了解该病原体的生物学特性和流行病学特征提供帮助。
应用[4-5]
兽类嗜衣原体PCR试剂盒可以用于鹦鹉热嗜衣原体禽鸟株的分离、鉴定与基因分型
优化鹦鹉热嗜衣原体（Chlamydophila psittaci，C.psittaci，Cps）禽鸟株分离鉴定培养技术，通过测序及进化树分析ompA基因的多态性，研究Cps的种系发育史及获得可靠Cps感染的流行病学资料，掌握衡阳地区Cps的流行病学特征，从而为Cps感染的预防、诊断、治疗措施提供依据。
方法：收集衡阳地区可疑的禽鸟标本，利用兽类嗜衣原体PCR试剂盒，提取禽鸟肝组织全基因组DNA，设计MOMP特异性引物，PCR扩增约264bp的基因片段，用1.7%琼脂糖凝胶电泳分离。将PCR阳性禽鸟标本肝组织匀浆液接种到单层敏感细胞株人喉癌上皮细胞（Hep-2）细胞和非洲绿猴肾细胞(Vero)中培养，免疫荧光染色法（IF）鉴定Cps包涵体，免疫荧光显微镜下观察两种细胞内包涵体形态的变化。按照文献设计另一对MOMP特异性引物，PCR扩增约1000bp的基因片段，用1.2%琼脂糖凝胶电泳分离，将阳性PCR产物进行纯化后送往测序公司进行测序，同时从Genebank中获得Cps各型参考株的ompA基因序列，利用软件ClustalX2和MEGA3构建系统进化树分析临床株与各参考株之间的亲缘关系。通过BLAST分析8例标本基因间的相似性。
结果：通过PCR扩增及测序的方法从591例禽鸟标本（其中鹦鹉425只，鸽子23只及其它类型禽鸟143只）中检测到8例阳性，其中7例来源于鹦鹉，染率约为1.64%，1例来源于相思鸟。鸽子的染率为0%，其它类型禽鸟的染率约为0.69%；8例阳性标本在Hep-2及Vero细胞中成功培养出7株，成功率为87.5%；通过Cps在Hep-2细胞与Vero细胞中培养生长情况的比较，发现Hep-2细胞在原代培养时其胞内包涵体形成单位（IFU）数量大于Vero细胞，培养三代后免疫荧光染色发现，Vero细胞内的IFU数量较Hep-2细胞大；对8例阳性禽鸟标本PCR产物ompA基因序列进行测序，测序结果与Cps各型参考株ompA序列进行软件分析，系统进化树显示其中7例为A型，另外一例暂未能分型；将8例阳性禽鸟标本PCR产物ompA基因序列与C.psittaci6BC标准株ompA基因进行BLAST分析，Cps6BC与其中7例的相似度在92%～99%之间，另外一例与Cps6BC的相似度仅为58%；将E9的ompA基因与Genebank中其它已知菌株基因进行比对也未能对其进行确定。
结论：（1）成功分离Cps禽鸟株7株，并完善了Cps阳性禽鸟株分离鉴定培养技术；
（2）衡阳地区Cps可能主要以鹦鹉为其宿主，以基因型A为主要型别，且存在一定的变异。
参考文献
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[2]Prevalence of Chlamydia psittaci in the feral pigeon population of Basel,Switzerland..Geigenfeind Ila;;Vanrompay Daisy;;Haag-Wackernagel Daniel.Journal of medical microbiology,2012
[3]Impact of urban environment and host phenotype on the epidemiology of Chlamydiaceae in feral pigeons(Columba livia).J.Gasparini;N.Erin;C.Bertin;L.Jacquin;F.Vorimore;A.Frantz;P.Lenouvel;K.Laroucau.Environmental Microbiology,2011
[4]Zoonotic transmission of Chlamydia psittaci in a chicken and turkey hatchery..Dickx Veerle;;Vanrompay Daisy.Journal of medical microbiology,2011
[5]陈俊.鹦鹉热嗜衣原体禽鸟株的分离、鉴定与基因分型[D].南华大学,2013.