利什曼原虫通用PCR试剂盒的应用

2023/12/28 8:43:23

背景[1-3]

利什曼原虫通用PCR试剂盒是一种专门用于检测利什曼原虫的PCR试剂盒。该试剂盒利用PCR技术,通过特定的引物和探针,对利什曼原虫的DNA进行扩增,从而实现对利什曼原虫的快速、准确检测。

利什曼原虫是一种引起利什曼病的病原微生物,具有较高的传染性和致病性。利什曼病是一种由利什曼原虫引起的寄生虫病,主要通过白蛉叮咬传播给人类和动物。利什曼原虫通用PCR试剂盒可以用于检测疑似感染利什曼原虫的动物样本,如血液、组织等。通过检测利什曼原虫的DNA,可以确定感染源,为防控和治疗利什曼病提供科学依据。

利什曼原虫是一种寄生虫,可以引起利什曼病,这是一种严重的热带疾病。该试剂盒包含PCR反应体系和引物,可以扩增利什曼原虫的DNA序列,从而实现对利什曼原虫的快速检测和鉴定。

利什曼原虫通用PCR试剂盒通常包括以下组分:

PCR反应缓冲液:用于调节PCR反应体系的pH值和离子强度。

dNTPs:即脱氧核苷酸三磷酸,是PCR反应中必需的原料。

MgCl2:即二氢氧化镁,是PCR反应中必需的离子。

TaqDNA聚合酶:即热稳定DNA聚合酶,可以催化DNA的合成反应。

引物:即特异性DNA序列,可以与目标DNA序列互补结合,引导PCR反应进行。

利什曼原虫通用PCR试剂盒.png

利什曼原虫通用PCR试剂盒

利什曼原虫通用PCR试剂盒的操作步骤如下:

1.样本采集:从患者体内采集血液、粪便、组织等样本,并将其保存在无菌容器中。

2.DNA提取:将采集到的样本进行DNA提取,通常采用柱式或磁珠式DNA提取试剂盒。提取后的DNA应保存在-20°C或更低的温度下。

3.PCR反应体系准备:根据羊痘病毒PCR试剂盒说明书的要求,配制PCR反应体系,包括引物、荧光探针、dNTPs、DNA聚合酶等。

4.PCR反应:将提取的DNA加入到PCR反应体系中,进行PCR反应。反应条件和时间根据试剂盒说明书的要求进行设置。

5.结果分析:将PCR反应后的产物进行荧光信号检测,根据荧光信号的出现情况判断是否存在利什曼原虫的感染。

应用[4-5]

利什曼原虫通用PCR试剂盒可以用于利什曼原虫检测方法建立及其在BALB/c鼠体内分布和增殖研究

以杜氏利什曼原虫和蜥蜴利什曼原虫为研究对象,采用吉姆萨染色和负染对具有不同致病性的杜氏利什曼原虫和蜥蜴利什曼原虫进行形态学研究,结果显示杜氏利什曼原虫前鞭毛体的虫体和鞭毛较蜥蜴利什曼原虫前鞭毛体的更加细长,在无鞭毛体的形态学方面无明显差异。以108/ml杜氏利什曼原虫和蜥蜴利什曼原虫经腹腔途径分别感染BALB/c小鼠,通过利什曼原虫间接免疫组化方法来分析定位其在小鼠体内的分布,结果显示杜氏利什曼原虫和蜥蜴利什曼原虫在小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏中均有分布。

利什曼原虫通用PCR试剂盒PCR方法来分析比较杜氏利什曼原虫和蜥蜴利什曼原虫在小鼠肝脏内的增殖情况,结果显示蜥蜴利什曼原虫与杜氏利什曼原虫相比,其在小鼠肝脏内的相对增殖量较少。感染小鼠组织病理学研究,结果显示杜氏利什曼原虫导致小鼠的心肌纤维断裂,间质增宽,肝脏的肝细胞疏散,肝细胞索见纤维增多,有的肝细胞萎缩,肝脏中巨噬细胞增多,脾脏组织灶状出血坏死、嗜酸性粒细胞增多、巨核细胞增多,巨噬细胞增多、淋巴细胞增多,肺泡壁增厚,巨噬细胞增生,肾脏肾小球肿胀,肾小球囊壁增厚,肾小管上皮轻度变性,着色不均;蜥蜴利什曼原虫除导致小鼠脾脏组织中巨核细胞增多外,无明显的组织病理学变化。

通过利什曼原虫通用PCR试剂盒荧光染色方法对表达荧光蛋白的蜥蜴利什曼原虫进行了小鼠体内分布定位研究,可清晰地看到利什曼原虫在小鼠体内的分布,并应用利什曼原虫通用PCR试剂盒PCR方法研究其在小鼠血液内的增殖情况,结果显示蜥蜴利什曼原虫在小鼠体内呈波浪状增殖。

参考文献

[1]A review of Leishmaniasis in Eastern Africa[J].Peter K.Ngure;;Albert Kimutai;;Zipporah W.Ng'ang'a;;Geoffrey Rukunga;;Willy K.Tonui.Journal of Nanjing Medical University,2009(2)

[2]Leish-111f,a recombinant polyprotein vaccine that protects against visceral Leishmaniasis by elicitation of CD4+T cells.[J].Coler Rhea N;;Goto Yasuyuki;;Bogatzki Lisa;;Raman Vanitha;;Reed Steven G.Infection and immunity,2007

[3]Global gene expression in Leishmania[J].Gabriela Cohen-Freue;;Timothy R.Holzer;;James D.Forney;;W.Robert McMaster.International Journal for Parasitology,2007(10)

[4]Transmission of Leishmania metacyclic promastigotes by phlebotomine sand flies[J].Paul A.Bates.International Journal for Parasitology,2007(10)

[5]李琳.利什曼原虫检测方法建立及其在BALB/c鼠体内分布和增殖研究[D].吉林大学,2012.

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