背景[1-3]
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳小分子量标准蛋白质是一组由不同蛋白质组成的混合物，通常用于在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中确定蛋白质的相对分子量。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳标准蛋白质的标准分子量通常在10到100 kDa之间。通过使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳标准蛋白质，研究人员可以确定样品中蛋白质的相对分子量，进而对蛋白质进行定性和定量分析。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）是一种基于蛋白质分子量的分离技术，其中小分子量标准蛋白质扮演了重要的角色。
实验原理：SDS-PAGE技术通过在聚丙烯酰胺凝胶系统中引入SDS（十二烷基硫酸钠），使蛋白质变性并统一带上负电荷。由于SDS与多肽链的结合量与分子量成正比，因此，SDS-多肽复合物在凝胶中的迁移率主要取决于多肽的大小。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳小分子量标准蛋白质
标准曲线制备：通常采用已知分子量的标准蛋白质（SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳标准蛋白质）制作标准曲线。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳标准蛋白覆盖了一定的分子量范围（如15KD到200KD）。将它们的迁移率与分子量对数作图，可以得到一条直线，这条直线可以用于测定未知样品的分子量。
实验步骤：进行SDS-PAGE时，首先需要配制适当浓度的聚丙烯酰胺凝胶。在电泳过程中，样品中的蛋白质会根据大小被分离，较小的蛋白质会迁移得更快，从而在凝胶上形成分离的条带。随后可以通过染色方法使蛋白质条带可视化，进而分析和比较样品的分子量。
问题及解决：在进行SDS-PAGE时可能会遇到一些问题，例如凝胶凝结不均匀或易碎等，这通常可以通过调整催化剂TEMED和过硫酸铵的使用量或确保试剂的新鲜度来解决。
应用[4-5]
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳小分子量标准蛋白质可以用于卵黄低密度脂蛋白的结构检测及卵黄蛋白的乳化性研究
鸡蛋对于制作多种食品乳化剂起关键作用,比如：蛋黄酱、奶酪和沙拉剂,尤其在油水间制成界面膜,它能够起到很好的成型和稳定作用。鸡蛋中含有丰富的优质蛋白,蛋白质主要成分有低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、卵黄蛋白和卵高磷蛋白。其中低密度脂蛋白是鸡蛋黄的主要成分,也是促使鸡蛋黄乳化性质的主要原因。低密度脂蛋白是体内携带胆固醇最多的脂蛋白,主要功能是把胆固醇运输到肝脏合成胆酸。低密度脂蛋白水平过高容易引起动脉粥样硬化,易患冠心病。
对卵黄低密度脂蛋白进行提取纯化,使用原子力显微镜纳米成像技术观察其表面形貌,激光拉曼光谱和傅里叶近红外光谱分析低密度脂蛋白分子功能团。
(1) 低密度脂蛋白的提取纯化：低密度脂蛋白纯化时,首先对其蛋白NaCI溶液进行离心,根据卵黄中各种蛋白颗粒的密度差异,除去多余蛋白；再使用硫酸铵梯度分离,近一步纯化蛋白,透析24小时；通过Sephadex G-200(5,000-600,OOODa)柱层析,利用颗粒分子量的差异得到纯度较高的低密度脂蛋白溶液。
(2)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测：使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳小分子量标准蛋白质对其浓度、蛋白成分进行检测,实验发现此方法能够提取出纯度较高的低密度脂蛋白,并证实其中的蛋白质成分包含5种分子量为130、80、65、60、15 kDa脱辅基蛋白。
(3)原子力显微镜观测低密度脂蛋白的表面形貌：实验使用分辨率较高的接触模式对三种不同浓度的脂蛋白进行观测,分别用蒸馏水稀释低密度脂蛋白溶液浓度为5μg/mL、10μg/mL、30μg/mL。研究发现,卵黄低密度脂蛋白的原子力显微镜纳米成像技术与其纯度、浓度有关。当浓度为5μg/mL时,容易得到单个卵黄低密度脂蛋白,尺度一般在50 nm到80 nm之间。随着浓度的增大(10μg/m),原子力显微镜获得的蛋白尺度增大,表现为少量聚集体；当浓度增大到30μg/mL时,原子力显微镜观察发现,卵黄低密度脂蛋白以聚合团形式相互缠绕,表明聚集体的形成可能与脂蛋白的乳化性质有关。
参考文献
[1]Preserving functional properties of hen’s egg yolk during freeze-drying[J].Thomas Jaekel;;Kirsten Dautel;;Waldemar Ternes.Journal of Food Engineering,2008(4)
[2]Molecular behavior of a microbial lipopeptide monolayer at the air–water interface[J].Chang-Sheng Song;;Ru-Qiang Ye;;Bo-Zhong Mu.Colloids and Surfaces A:Physicochemical and Engineering Aspects,2007(1)
[3]Validation of the drop coating deposition Raman method for protein analysis[J].Corasi Ortiz;;Dongmao Zhang;;Yong Xie;;Alexander E.Ribbe;;Dor Ben-Amotz.Analytical Biochemistry,2006(2)
[4]Surface properties of hen egg yolk low-density lipoproteins spread at the air–water interface[J].Virginie Martinet;;Patrick Saulnier;;Valérie Beaumal;;Jean-Luc Courthaudon;;Marc Anton.Colloids and Surfaces B:Biointerfaces,2003(1)
[5]薛慧君.卵黄低密度脂蛋白的结构检测及卵黄蛋白的乳化性研究[D].陕西师范大学,2011.