背景[1-3]
LS180是一种人结肠腺癌细胞系，常被用作生物医学研究的模型系统。这种细胞系来源于一名患有结肠腺癌的患者的肿瘤组织，并经过实验室的培养和传代，保持了遗传稳定性。
LS180 细胞系具有一些特定的生物学特性，如增殖速度快、易于培养和具有特定的基因表达模式。这些特性使得 LS180 成为研究结肠腺癌发病机制、药物筛选和基因治疗等领域的理想模型。
在研究中，LS180 细胞系常被用来模拟结肠腺癌的生长和侵袭行为，以及研究结肠癌发生和发展的分子机制。此外，LS180 细胞系也常被用作药物筛选的模型，以评估潜在抗癌药物对结肠腺癌细胞的杀伤作用。
然而，与 LS180 细胞系类似，LS180 细胞系虽然具有一定的代表性，但并不能完全模拟真实的人体环境。因此，在将实验结果应用于临床之前，也需要进行更多的实验验证和临床研究。
LS180
LS180细胞培养操作
1)复苏LS180细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2)LS180细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
3)LS180细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
应用[4-5]
LS180可以用于MSI-H/S结直肠癌差异表达分子的筛选及其在免疫治疗中的意义
MSI-H/S结直肠癌细胞模型的建立 肿瘤异质性是恶性肿瘤重要特征之一，其可以表现在肿瘤分化水平及肿瘤功能水平上的差异，也可以表现在具有异质性的抗原表达或出现不同生物特性细胞亚群。我们根据肿瘤的异质性特征，利用单克隆化技术，对文献已报道过的MSI-H的结直肠癌细胞进行单克隆化，通过荧光PCR反应及GENE SCAN技术对PCR产物进行扫描后，确定每个单克隆细胞株的微卫星状态，最终筛选出MSS的细胞群体，从而在体外建立同一细胞来源的MSI-H/S细胞模型。
这部分研究对5株文献已经报道为MSI-H的结直肠癌细胞（分别是LS174t、LS180、HCT15、HCT116、SW48）进行了单克隆化，最终长成集落的单克隆细胞株数分别是LS174t为71株、LS180为81株、HCT15为25株、HCT116为65株、SW48为37株。通过荧光PCR技术，对最终筛选出的单克隆细胞株进行MSI分型后，确定为MSS的细胞株数并进行标记，标记方法为：不同批次单克隆化+序号，如LTE-1表示某批次单克隆化的第1号单克隆细胞株，其中LS174t为21株，标记为LTE-1，2，4，5，6，7，8，9，10，11，12; LTT-1，2，3，4，5，6，7，8，11，12，最终将这21株细胞群体合命名为LS174t-MSS，将其余50株细胞群体合命名为LS174t-MSI-H；LS180为11株，标记为HSO-1，2，10，12；
HSW-1，2，3，6，8，9，11，最终将这11株细胞群体合命名为LS180-MSS，其余70株细胞群体合命名为LS180-MSI-H；HCT15为12株，标记为LSF-1，2，3，4，5，6，7，8，14，15，17，18，最终将这12株细胞群体合命名为HCT15-MSS，其余13株细胞群体合命名为HCT15-MSI-H；HCT116为10株，标记为HF-2，3，4，5，13，14，16，22，23，25，最终将这10株细胞群体合命名HCT116-MSS，其余55株细胞群体合命名为HCT116-MSI-H；SW48为10株，标记为SWS-2，6，10，12，14，15；SWT-1，2，3，4，最终将这10株细胞群体合命名为SW48-MSS，其余27株细胞群体合命名为SW48-MSI-H，从而在体外建立了同一细胞来源的MSI-H/S细胞模型，通过细胞形态学的研究发现MSI-H/S的细胞株存在差异，特别是LS180模型中MSI-H与MSS细胞形态差异明显。
对三组MSI-H/S结直肠癌细胞模型（HCT116，LS180，LS174t）进行基因表达谱芯片（Whole-Genome gene array, Affymetrix）的分析，所有样品中每个基因（probeset）的信号值均采用Robust Multichip Analysis（RMA）归一化方法，采用SAM（Significance Analysis of Microarrays）软件进行差异表达基因的筛选。结果显示在LS180-MSI-H与LS180-MSS模型中差异表达的基因有2216个，其中LS180-MSI-H细胞中表达上调的基因1456个，对这些上调的基因进行通路分析后发现，其最为相关的通路是细胞因子与细胞因子受体作用通路。
参考文献
[1]Targeting the Tumor Microenvironment for Cancer Therapy[J]. Sounni, Nor Eddine;;Noel, Agnès.Clinical Chemistry,2013(1)
[2] T cell anergy, exhaustion, senescence, and stemness in the tumor microenvironment[J]. Joel Crespo;;Haoyu Sun;;Theodore H Welling;;Zhigang Tian;;Weiping Zou.Current Opinion in Immunology,2012
[3] Redefining Clinical Trials: The Age of Personalized Medicine[J]. Gayathri Vaidyanathan.Cell,2012(6)
[4] Fas/FasL-dependent and -independent activation of caspase-8 in doxorubicin-treated human breast cancer MCF-7 cells: ADAM10 down-regulation activates Fas/FasL signaling pathway[J]. Wen-Hsin Liu;;Long-Sen Chang.International Journal of Biochemistry and Cell Biology,2011(12)
[5] Association of MicroRNA Expression with Microsatellite Instability Status in Colorectal Adenocarcinoma[J]. Jonathan S.L. Earle;;Rajyalakshmi Luthra;;Angela Romans;;Ronald Abraham;;Joe Ensor;;Hui Yao;;Stanley R. Hamilton.The Journal of Molecular Diagnostics,2010(4)
[5]黄晓辉. MSI-H/S结直肠癌差异表达分子的筛选及其在免疫治疗中的意义[D].第二军医大学,2014.