三羟甲基氨基甲烷盐酸盐别称Tris-HCL,其是生物大分子在稳定保存,电泳以及分析实验中常用到的缓冲液组分。Tris-HCL缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。Tris-HCL被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。Tris-HCL缓冲液的低离子强度特点可用于线虫核纤层蛋白的中间纤维的形成。此外,Tris-HCL还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。
应用
三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Tris-HCl)作为一种常用的缓冲剂,在PCR、DNA和蛋白质电泳、蛋白质纯化等领域有着广泛的应用。
配制原理
1、选择合适的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐:首先,要选择纯度高的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐原料,原料的纯度将直接影响到实验的质量和结果。同时,还需要根据实验所需的pH值和浓度来确定所需的量。
2、溶解与中和:将适量的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐粉末加入到去离子水中,搅拌使其完全溶解。
3、pH值的调节与稳定:三羟甲基氨基甲烷盐酸盐的缓冲能力主要来自于三羟甲基氨基甲烷分子上的氨基和羟基。当溶液受到酸性或碱性物质的影响时,其分子上的氨基和羟基能够吸收或释放氢离子,从而维持溶液的pH值稳定。因此,在配制时,需要选择合适的pH值,以保证其缓冲效果。
4、溶液的浓度与体积:三羟甲基氨基甲烷盐酸盐的浓度和体积也是配制过程中需要考虑的因素。浓度过高可能导致溶液过于饱和,影响实验效果;而浓度过低则可能降低缓冲效果,因此需要根据实验需求来确定合适的浓度和体积。
5、配比计算:根据所需的浓度和体积,通过简单的配比计算,确定总体三羟甲基氨基甲烷盐酸盐的加入量。需要注意的是,配制时应该按照化学计量比例,确保充分反应。
6、过滤与保存:配制好的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐溶液需要进行过滤,以去除其中的杂质和颗粒物。过滤后的溶液应保存在密封的容器中,避免阳光直射和高温,从而保证其稳定性和使用寿命。
毒性
三羟甲基氨基甲烷盐酸盐的毒性低,可致癌,不要直接接触皮肤。
贮存方法
保持贮藏器密封、储存在阴凉、干燥的地方,确保工作间有良好的通风或排气装置