AMPK1抗体的应用

2024/6/4 9:18:40 作者:云霄

背景[1-3]

AMPK1抗体是一种特异性识别和结合AMPK1蛋白的抗体。AMPK1是一种丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中的激酶,参与调控细胞能量代谢、自噬和细胞生长等过程。

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AMPK1抗体

AMPK1抗体功能与应用:

AMPK是一种在所有真核细胞中保守的细胞能量感受器,通过磷酸化调节许多关键代谢酶的活性。

响应于细胞内ATP水平的降低,AMPK可激活能量产生途径并抑制能量消耗过程,包括抑制蛋白质、碳水化合物和脂质的生物合成,以及减少细胞生长和增殖。

AMPK1抗体可用于人、小鼠、大鼠背景下的多种实验技术,如Western Blot(WB)、免疫组织化学-石蜡切片(IHC-P)、免疫细胞化学/免疫荧光(ICC/IF)、免疫沉淀(IP)、流式细胞仪分析(FC)等。

AMPK1抗体在生物医学研究中具有广泛的应用,如:

免疫组化:通过免疫组化技术,可以检测组织或细胞中AMPK1的表达和分布,从而了解其在生理和病理过程中的作用。

免疫印迹:AMPK1抗体可用于免疫印迹实验,检测AMPK1在蛋白质水平上的表达。

细胞培养:AMPK1抗体可用于细胞培养实验,如流式细胞术、ELISA等,以研究AMPK1对细胞功能的影响。

药物筛选:AMPK1抗体可用于药物筛选实验,评估药物对AMPK1活性的影响,从而为治疗相关疾病提供依据。

临床诊断:AMPK1抗体在肿瘤诊断中具有潜在应用价值,如乳腺癌、结直肠癌等。通过检测AMPK1的表达水平,可以帮助医生判断病情和制定治疗方案。

AMPK1抗体在生物医学研究中具有重要的应用价值,有助于深入了解AMPK1在生理和病理过程中的作用,以及开发针对AMPK1的药物。

应用[4][5]

AMPK1抗体可以用于左、右归丸对AMPK/mTOR介导的PMOP大鼠糖、脂代谢及能量代谢的实验研究

研究从中医学“阴阳互济”的理论出发,选用张景岳创立滋补肾阴的代表方剂左归丸和温补肾阳的代表方剂右归丸,通过研究左、右归丸对PMOP模型大鼠糖、脂代谢和能量代谢的影响,以及左、右归丸基于AMPK1抗体AMPK/m TOR信号通路对PMOP模型大鼠糖、脂代谢紊乱和能量代谢紊乱的防治作用,为“阴阳互济”理论指导防治PMOP女性绝经后代谢紊乱提供实验依据。

材料与方法:本实验选取SPF级2月龄雌性未生育SD大鼠60只,体重在200220g,按照体重随机分层为空白组(KB)8只,假手术组(SHAM)8只,去卵巢模型组44只。去卵巢模型组采用双侧背部卵巢切除术制备模型,假手术组只切除卵巢周围与卵巢等大的部分脂肪组织,而空白组(KB)则不做任何处理。术后1周,因双侧背部卵巢切除术死亡的大鼠有4只,将成活的40只大鼠再次按体重随机分为去卵巢模型组(OVX)、左归丸组(ZGW)、右归丸组(YGW)、补佳乐组(BJL),与原来的空白组(KB)和假手术组(SHAM)共计6组。各治疗组灌胃对应药物,KB组、SHAM组、OVX组灌胃蒸馏水。经过12周给药治疗后,剔除死亡大鼠和不符合纳入标准的大鼠8只。

本实验共计纳入实验大鼠48只,每组各8只。各组大鼠在麻醉状态下进行左侧股骨骨密度检测,并采用剪尾取血的方法进行糖耐量检测。取材前24h禁食不禁水,末次给药2h后称重,并按0.3m L·100g-1的标准为各组大鼠腹腔注射10%水合氯醛溶液进行麻醉。待大鼠麻醉后进行腹主动脉取血,取得的血液静置2h后按2000r/min*20min来进行离心,将离心提取的血清分装于无菌EP管并置于﹣80℃冻存,待用全自动生化分析仪检测血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、谷丙转氨酶、谷草转氨酶;取大鼠左侧后肢胫骨近端1/3部分,仔细剥离胫骨附着的肌肉筋膜及结缔组织,固定并脱钙数周后制作石蜡切片,用于形态学HE检测;取大鼠新鲜肝脏后称量湿重,用于统计大鼠肝脏指数,再将肝脏前叶装于无菌EP管并置于﹣80℃冻存,用于形态学HE检测;取大鼠肩胛部棕色脂肪组织及腹后壁脂肪组织称量湿重,用于统计大鼠肩胛部棕色脂肪指数和腹后壁脂肪指数,并将肩胛部棕色脂肪组织置于4%多聚甲醛固定,用于形态学HE检测,将腹后壁脂肪组织装于无菌EP管并置于﹣80℃冻存,采用AMPK1抗体蛋白印迹法(WB)检测大鼠腹后壁脂肪组织AMPKα1、m-TORC1、p70S6k1的蛋白磷酸化表达情况,C/EBPα、C/EBPβ、TSC2、Rheb、4EBP1的蛋白表达情况;采用实时荧光定量PCR法检测大鼠腹后壁脂肪组织AMPKα1、m-TORC1的基因表达情况;采用高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠腹后壁脂肪组织中ATP含量。

参考文献

[1]High-intensity body weight training is comparable to combined training in changes in muscle mass,physical performance,inflammatory markers and metabolic health in postmenopausal women at high risk for type 2 diabetes mellitus:A randomized controlled clinical trial[J].Fernanda Maria Martins;;Aletéia de Paula Souza;;Paulo Ricardo Prado Nunes;;Márcia Antoniazi Michelin;;Eddie Fernando Candido Murta;;Elisabete Aparecida Mantovani Rodrigues Resende;;Erick Prado de Oliveira;;Fábio Lera Orsatti.Experimental Gerontology,2018

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[3]Associations of visceral fat area and physical activity levels with the risk of metabolic syndrome in postmenopausal women[J].Izabela Zaj?c-Gawlak;;Barbara K?apcińska;;Aleksandra Kroemeke;;Dariusz Po?piech;;Jana Pelclová;;Miroslava P?idalová.Biogerontology,2017(3)

[4]Ciclopirox olamine inhibits mTORC1 signaling by activation of AMPK[J].Hongyu Zhou;;Chaowei Shang;;Min Wang;;Tao Shen;;Lingmei Kong;;Chunlei Yu;;Zhennan Ye;;Yan Luo;;Lei Liu;;Yan Li;;Shile Huang.Biochemical Pharmacology,2016

[5]史馨钰.左、右归丸对AMPK/mTOR介导的PMOP大鼠糖、脂代谢及能量代谢的实验研究[D].辽宁中医药大学,2021.

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