背景技术
α‑淀粉酶在人体生理循环中起着关键作用，被用作一些相关疾病的重要指标，如急性胰腺炎、急性有机磷农药中毒、焦虑或抑郁等。 4,6-亚乙基-对硝基苯-Α-D-麦芽七糖苷(EPS‑G7)作为α‑淀粉酶的底物，是一种体外检测人血清或尿液中α‑淀粉酶(AMS)活性的商用检测试剂，具有灵敏度高、抗干扰能力强的优势。其分子量为1299.41，是白色或近白色固体粉末。
4,6-亚乙基-对硝基苯-Α-D-麦芽七糖苷由对硝基苯(G1)‑α‑D‑麦芽七糖苷(pNP‑α‑G7)经一步化学修饰得到，因此pNP‑α‑G7的制备是合成EPS‑G7的关键。到目前为止，文献中pNP‑α‑G7都是通过酶法制备，最常见的方法有两种。第一种是将α‑环糊精开环得到麦芽六糖，再与对硝基苯‑α‑D‑葡萄糖苷(pNP‑α‑G1)在酶的催化下合成pNP‑α‑G7。第二种是转糖基化法，由pNP‑α‑G1和麦芽七糖在 转移酶催化下制备pNP‑α‑G7。
化学合成4,6-亚乙基-对硝基苯-Α-D-麦芽七糖苷的关键在于pNP‑α‑G7的α‑选择性合成。而目前糖基化反应的方法 大多生成β‑糖苷，α‑糖苷，特别是1,2‑顺式‑α‑糖苷的化学合成较难实现立体选择性，且现有的方法存在底物活化步骤长、底物受限、需要金属催化剂参与等不足。因此，开发新型合成方法实现1,2‑顺式‑α‑糖苷键的构建并应用于4,6-亚乙基-对硝基苯-Α-D-麦芽七糖苷的化学合成具有重要的应用价值。
制备方法
(1)β‑环糊精A与醋酐在20‑30℃下反应12h，得到β‑乙酰环糊精B；
(2)将中间体B溶于乙酸酐/浓硫酸(V/V＝49:1)的混合液中，在40‑60℃下反应 24h，得到链状乙酰化七糖C；
(3)在缩合试剂存在的条件下，中间体C与对硝基苯酚在0‑40℃反应1‑9h，得到以α 为优势构型的关键中间体p‑硝基苯基(G1)‑O‑乙酰基‑D‑麦芽七糖苷D；
(4)关键中间体D与甲醇钠在20‑30℃下反应24‑48h，得到pNP‑α‑G7(p‑硝基苯基 (G1)‑D‑麦芽七糖苷)；
(5)pNP‑α‑G7在对甲苯磺酸和二甲氧基乙烷的存在下，在55℃反应24h，得到EPS‑G7(4,6-亚乙基-对硝基苯-Α-D-麦芽七糖苷)。
参考文献
[1]浙江大学. 一种EPS-G7的化学合成方法:CN202310039000.1[P]. 2023-05-09.