DCC抗体的应用

2024/8/16 13:35:24 作者:云霄

背景[1-3]

DCC抗体是一种用于研究DCC蛋白的抗体。DCC蛋白是一种在多种生物过程中发挥重要作用的蛋白质,包括神经生长锥的导向、细胞黏附分子的介导、以及作为肿瘤抑制因子等。DCC蛋白在人体内由DCC基因编码,属于免疫球蛋白超家族的细胞粘附分子,是一种跨膜蛋白,并作为netrin 1的受体。该蛋白在神经元生长锥的轴突导向中起重要作用,并通过与酪氨酸激酶Src和局部粘附激酶(FAK)的相互作用介导轴突吸引。此外,DCC蛋白还具有肿瘤抑制功能,在结直肠癌和食管癌等癌症中常发生突变或下调。

DCC蛋白作为netrin 1的受体,在神经元发育和轴突导向中起关键作用。同时,DCC蛋白的肿瘤抑制功能使其成为癌症研究中的重要靶点。DCC抗体的研发和应用为深入了解DCC蛋白的功能和机制提供了有力的工具,也为癌症的诊断和治疗提供了新的思路和方法。

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DCC抗体

DCC抗体广泛应用于科研领域,如Western Blot、免疫组织化学、免疫细胞化学等。

以下是一些提供DCC抗体的供应商及其产品信息:

Abcam提供多种DCC抗体,包括兔多克隆抗体(ab196598)和兔单克隆抗体(ab273576)。这些抗体适用于免疫细胞化学、免疫组织化学、免疫沉淀、流式细胞术等。推荐的稀释比例如下:ICC/IF 1/100-1/500,WB 1/500-1/2000。

Santa Cruz Biotechnology提供小鼠单克隆抗体(A-1),适用于Western Blot、免疫沉淀、免疫荧光和ELISA。该抗体对小鼠、大鼠和人的DCC蛋白有反应。

赛默飞世尔科技公司提供多克隆抗体(PA5-50946),适用于Western Blot、免疫细胞化学和ELISA。推荐的稀释比例如下:WB 1:500-1:2,000,ICC/IF 1:200-1:1,000,ELISA 1:20,000。

在使用DCC抗体时,应根据实验需求和所选抗体的说明书来调整稀释比例和实验步骤。不同抗体可能会有不同的最佳使用条件,因此在实验前仔细阅读抗体的使用说明非常重要。

应用[4][5]

DCC抗体可以用于DCC与P53、VEGF基因在结直肠癌表达的相关性研究及DCC基因杂合性缺失的临床意义

癌变时DCC基因存在多种改变,杂合子缺失(loss of heterozygosity,LOH)即是其中之一。LOH反映了抑癌基因功能缺失的情况,并可能与肿瘤的分化及转移等都存在一定的关系。国内外已有文献报道VEGF及P53表达的相关性研究,也提示两者的表达存在明显的关联。而DCC与肿瘤组织的VEGF及P53表达是否存在一定的相关性,则未晰仁大母硕士李位论义见报道。另外考虑到象P53及DCC基因在消化道肿瘤中的表达都非常明显,因此在本课题研究中侧重研究DCC与P53、vEGF在结直肠癌中表达的相关性及其与肿瘤恶性程度的关系,从而进一步为揭示肿瘤的发病规律提供分子生物学基础。

实验方法:DCC抗体免疫组化(Immunohistoehemist)部分:1、标本的来派和选择选择杭州市红十字会医院1999一2002年结直肠癌手术切除标本41例,各病例病理诊断明确,主要组织学类型包括腺癌、粘液腺癌、印戒细胞癌等。

2、免疫组化常规石蜡切片,应用DCC抗体免疫组化二步法检测结直肠癌的P53、VEGF及DCC蛋白表达,使用抗体为P53单克隆抗体及VEGF鼠抗人单克隆抗体,分别购自上海长岛和北京中山生物技术有限公司,DCC兔抗人多克隆抗体为武汉博士德公司产品,二抗使用通用型二步法免疫组化检测试剂。

3、DCC抗体结果判定P53蛋白位于细胞核内,阳性表达细胞多为弥漫分布;VEGF染色位于胞膜及胞浆内,癌组织内阳性细胞以弥散分布为主:DCC蛋白阳性染色主要位于细胞浆内,以上阳性染色均呈棕黄色细颗粒状。

参考文献

[1]DCC regulates cell adhesion in human colon cancer derived HT-29 cells and associates with ezrin[J].MercèMartín;;Patricia Simon-Assmann;;Michèle Kedinger;;Marianne Martin;;Paul Mangeat;;Francisco X.Real;;Myriam Fabre.European Journal of Cell Biology,2006(8)

[2]Colorectal cancer:genetics of development and metastasis[J].Tetsuji Takayama;;Koji Miyanishi;;Tsuyoshi Hayashi;;Yasushi Sato;;Yoshiro Niitsu.Journal of Gastroenterology,2006(3)

[3]A systematic review and meta-analysis of the relationship between chromosome 18q genotype,DCC status and colorectal cancer prognosis[J].Sanjay Popat;;Richard S.Houlston.European Journal of Cancer,2005(14)

[4]Deleted in Colorectal Cancer Protein Expression as a Possible Predictor of Response to Adjuvant Chemotherapy in Colorectal Cancer Patients[J].Rivka Gal;Evgeny Sadikov;Jaqueline Sulkes;Baruch Klein;Rumelia Koren.Diseases of the Colon&Rectum,2004(7)

[5]仇容.DCC与P53、VEGF基因在结直肠癌表达的相关性研究及DCC基因杂合性缺失的临床意义[D].浙江大学,2004.

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