小鼠气管平滑肌细胞的培养

2020/2/23 10:23:04

背景及概述[1-2]

平滑肌细胞又叫平滑肌纤维,系构成平滑肌的纤维状长细胞。由于平滑肌所分布的部位不同,平滑肌细胞的长度很不一致,在小血管壁上的平滑肌细胞长度仅有20μm左右,妊娠期子宫壁平滑肌细胞可长达500μm,位于一般器官平滑肌细胞的长度约200μm左右,此细胞的宽度在7μm以内。平滑肌细胞多聚集成束,细胞轮廓不清,需用适当浓度的酸(碱)溶液将其分离,方可获得外形完整的肌细胞。细胞内只有1个细胞核,呈椭圆形或长杆状,位于细胞中段最宽的部分,长度与纵轴平行,核染色质为纤细网状,可见2个以上核仁。在制作切片标本时,如肌细胞收缩则可变粗,核也随之变粗,甚至可出现螺旋形的扭曲。

细胞培养[1]

小鼠气管平滑肌细胞分离自气管组织;气管(Trachea),呼吸器官的一部分;为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘,与环状软骨相连;向下至第四、五胸椎体(相当胸骨角平面)交界处,分左、右主支气管,分叉处称为气管杈。气管平滑肌是气管的重要结构组成之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用;能够保持气道张力,维持气道管状形态,从而有利于气体流通,保持肺部通气。

小鼠气管平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。小鼠气管平滑肌细胞的异常是呼吸道疾病的重要病理特征之一,其增生、肥大是气道重塑的关键。小鼠气管平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合组织贴块法制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞经alpha-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

主要参考资料

[1] 新编实用医学词典

[2] 中国老年百科全书·生理·心理·长寿卷

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