人髓系细胞触发受体-1(TREM-1)Elisa试剂盒的应用

2024/9/6 11:43:17 作者:云霄

背景[1-3]

人髓系细胞触发受体-1(TREM-1)Elisa试剂盒是用于检测人样本(如血清、血浆、组织匀浆等)中人髓系细胞触发受体-1表达水平的实验工具。以下是对该试剂盒的详细介绍:

人髓系细胞触发受体-1(TREM-1)Elisa试剂盒.png

人髓系细胞触发受体-1(TREM-1)Elisa试剂盒

一、基本信息

产品名称:人髓系细胞触发受体-1(TREM-1)ELISA试剂盒

用途:主要用于科研实验,检测人样本中人髓系细胞触发受体-1的含量,不得用于临床诊断或其他非科研用途。

保存条件:一般建议存储于2-8℃的冷藏环境中,以确保试剂的稳定性和活性。

保质期:通常为6个月,具体以产品说明书为准。

规格:常见的有48T和96T两种规格,分别代表试剂盒可进行48次和96次检测。不同规格和供应商的价格可能有所不同。

二、产品特点

高灵敏度与特异性:采用先进的ELISA技术,能够高灵敏度、特异性地检测人样本中的人髓系细胞触发受体-1。

操作简便:试剂盒通常包含完整的试剂组分和详细的操作说明书,用户只需按照说明书步骤操作即可完成实验。

稳定性好:试剂盒中的组分经过严格的质量控制,确保实验的稳定性和重复性。

三、操作步骤

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜,37℃反应60分钟。

3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液)100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。

注意事项

在使用前请仔细阅读产品说明书,了解试剂盒的规格、保存条件、操作步骤及注意事项等信息。

实验过程中应注意无菌操作,避免交叉污染。

样本采集后应尽早进行提取和实验,如需保存,请按照说明书要求选择合适的保存条件。

实验结果仅供参考,具体结论需结合其他实验数据和临床信息综合判断。

应用[4][5]

人髓系细胞触发受体-1(TREM-1)Elisa试剂盒可以用于TREM-1基因多态性及血清sTREM-1与冠心病易感性的相关性

髓系细胞触发受体-1(TREM-1)为TREM家族成员之一,是一种免疫球蛋白超家族活化受体,其在体内的存在方式包括膜结合型(TREM-1)和可溶型(sTREM-1)。TREM-1可通过与DNAX激活蛋白12(DAP12)发生偶联,触发下游信号通路级联反应,增强核转录因子-κB(NF-κB)活性并促进NF-κBP50/P65亚单位入核,启动炎性因子表达,在动脉粥样硬化中发挥重要作用,故其基因有可能为冠心病的易感基因。

目的:探讨TREM-1基因多态性(rs2234237及rs9471535)及血清sTREM-1与冠心病的关系,分析TREM-1基因多态性(rs2234237及rs9471535)对血清sTREM-1表达的影响。

方法:采用病例对照研究方法。选择120例冠心病患者作为冠心病组,根据美国心脏病学会/美国心脏协会基金会(ACCF/AHA),将冠心病组分为两个亚组(亚型),包括17例SAP患者、103例ACS患者。同期选取90例健康人作为对照组。采用Sanger法对所有受试者TREM-1基因(rs2234237及rs9471535)单核苷酸多态性(SNPs)分析,采用人髓系细胞触发受体-1(TREM-1)Elisa试剂盒酶联免疫吸附法检测血清sTREM-1水平。应用SPSS23.0统计软件对数据进行分析。比较各组基线临床资料和基因型及等位基因分布频率。非条件Logistic回归分析TREM-1基因(rs2234237及rs9471535)多态性与冠心病及其亚型易感性的关系。相关性分析TREM-1基因多态性(rs2234237及rs9471535)及血清sTREM-1与冠心病严重程度的相关性。分别比较rs2234237及rs9471535多态性位点各基因型间血清sTREM-1水平,分析TREM-1基因(rs2234237及rs9471535)多态性对血清sTREM-1表达的影响。

人髓系细胞触发受体-1(TREM-1)Elisa试剂盒结果:1.冠心病组吸烟、高血压、糖尿病与血脂异常比例及空腹血糖(FBG)水平显著高于对照组(P<0.05),而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著低于对照组(P<0.05)。在冠心病亚组中,SAP组高血压比例及年龄水平显著高于对照组(P<0.05)。冠心病亚组中的ACS组吸烟、高血压、糖尿病、血脂异常比例及FBG、甘油三酯(TG)水平显著高于对照组(P<0.05),而HDL-C水平显著低于对照组(P<0.05)。

参考文献

[1]Myosin 1f is specifically required for neutrophil migration in 3D environments during acute inflammation[J].Melanie Salvermoser;;Robert Pick;;Ludwig T.Weckbach;;Annette Zehrer;;Phillip Lohr;;Maik Drechsler;;Markus Sperandio;;Oliver Soehnlein;;Barbara Walzog.Blood,2018(17)

[2]The Interplay of Lipids,Lipoproteins,and Immunity in Atherosclerosis.[J].Pirillo Angela;;Bonacina Fabrizia;;Norata Giuseppe Danilo;;Catapano Alberico Luigi.Current atherosclerosis reports,2018

[3]Emerging Associations Between Neutrophils,Atherosclerosis,and Psoriasis[J].G.E.Sanda;;A.D.Belur;;H.L.Teague;;Nehal N.Mehta.Current Atherosclerosis Reports,2017(12)

[4]Application of Single-Nucleotide Polymorphism-Related Risk Estimates in Identification of Increased Genetic Susceptibility to Cardiovascular Diseases:A Literature Review.[J].Fiatal Szilvia;;Ádány Róza.Frontiers in public health,2017

[5]陆娇.TREM-1基因多态性及血清sTREM-1与冠心病易感性的相关性[D].长江大学,2018.

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