背景及概述
链霉亲和素(Streptavidin,简称SA)是一种具有类似亲和素特性的蛋白质,能够抵抗蛋白酶消化、极端pH和温度。生物素-链霉亲和素复合物是常用的标志物之一,可用于结合蛋白质、脂质、核酸和合成分子,如荧光标记。在样本制备领域,链霉亲和素是许多纯化系统的核心组成部分,并在WB、IHC、ISH、流式细胞术、化学发光等领域发挥重要作用[1]。
特性
链霉亲和素是一种分子量约为65kDa,等电点为6.0的分泌性蛋白质,从链霉菌Streptomyces Avidinii培养物中提取而来。它是一个四聚体蛋白,可以与生物素高度特异性地结合。链霉亲和素-生物素复合物的解离常数非常低,是一种非常理想的生物素结合蛋白,适用范围比亲和素更广泛,因此在生物学上得到广泛应用。
图1 链霉亲和素结构示意图
应用领域
链霉亲和素具有与生物素特异结合的能力,并能与辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、荧光基团等结合。由于链霉亲和素的等电点较低,它参与了免疫学中的检测信号放大,广泛应用于化学发光、IHC、WB、IF、ISH、流式、核酸提取、蛋白纯化等实验,以及亲和色谱填料的制备、生物传感器和生物芯片的制作。
制法及安全信息
链霉亲和素的制法一般有两种:化学法和生物法。化学法主要是采用特定的化学方法将亲和性结构单元与高分子载体结合,形成链霉亲和素。生物法则是通过基因工程技术将亲和结构单元的基因插入到合适的表达系统中,通过表达和纯化获得链霉亲和素。
链霉亲和素的安全信息:它是一种合成的高分子化合物,不具有明显的毒性和危害性。在处理和处理废弃物时,应按照相关规定进行妥善处理,以防止对环境造成污染。
参考文献
[1]Green, NM. Avidin. Advances in protein chemistry. 1975, 29: 85–133.