去氢齿孔酮酸的制备方法

2020/10/18 17:56:53

背景及概述[1]

苓皮为多孔菌科真菌茯苓(Poriacocos(Schw.)Wolf)的干燥菌核外皮。中医学认为,茯苓味甘、淡、性平,具有利水渗湿、益脾和胃、宁心安神之功效。目前已有研究表明,茯苓皮具有免疫调节、抗肿瘤、抗惊厥、抑菌抗炎等作用。对茯苓乙醇提取物对肾病综合征的药效学及药动学进行研究,并指出茯苓三萜中去氢土莫酸、土莫酸、去氢茯苓酸、茯苓酸为茯苓乙醇提取物发挥药效的物质基础。然而,与茯苓相比,茯苓皮化学成分复杂,有多糖、三萜、脂肪酸、甾醇、酶等,其中多糖和三萜类物质为主要的活性成分,有研究表明茯苓皮中的三萜类物质含量远高于茯苓菌核。茯苓皮的提取物主要有效成分为3β-羟基-羊毛甾7,9(11),24-三烯-21-酸和去氢齿孔酮酸,与茯苓乙醇提取物中有效成分明显不同。

制备[1]

去氢齿孔酮酸提取制备如下:

(1)将茯苓皮用质量分数为1.5%的盐酸冲洗,然后用水冲洗至中性,晾干;

(2)将茯苓皮用体积分数为70%的乙醇溶液回流提取2次,每次提取时间为0.5h,茯苓皮与乙醇溶液的用量为1:10(g/ml),合并提取液,提取液回收乙醇至干;

(3)将步骤(1)的干物质用水溶解成溶液,加入体积比为7:1.5的正丁醇和乙酸乙酯的混合物萃取,正丁醇和乙酸乙酯的混合物的体积为水溶液的2倍,有机相回收溶剂至干,得粗品;

(4)粗品用100-120质量倍的乙醇溶解,配成溶液,所得溶液上中性氧化铝层析柱,中性氧化铝的质量为粗品的15倍,然后用乙醇和乙酸乙酯体积比为2:5的混合物进行洗脱,乙醇和乙酸乙酯混合物的用量为氧化铝的2倍,收集洗脱液;

(5)向洗脱液中加入活性炭,活性炭用量为粗品质量的3%,加热至沸腾并保持30min,趁热过滤,用乙醇洗涤活性炭,合并滤液及洗液,浓缩至原体积的1/3,静置沉淀、过滤、干燥,得茯苓皮三萜。对提取物中羟基-羊毛甾7,9(11),24-三烯-21-酸和去氢齿孔酮酸的含量进行测定,精密吸取上述对照品溶液及供试品溶液各10μL,分别注入液相色谱仪中。根据峰面积计算,3β-羟基-羊毛甾7,9(11),24-三烯-21-酸含量为30.15%,去氢齿孔酮酸含量为28.19%,两种物质共计58.34%。

主要参考资料

[1] CN201710219904.7茯苓皮三萜在制备治疗肾病药物中的应用

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