通过固相法合成得到组氨瑞林。 用二(对甲基苯基)甲胺为树脂,并用过量3倍的BOC和二环已基碳化二亚胺(DCC)作为致活剂,在二氯甲烷中反应2h,使BOC保护的甘氨酸和树脂偶合。然后连上下一个氨基酸,洗涤,脱保护。按下列操作连上下一个氨基酸。
步骤 | 试剂和操作 | 混合时间/min | 1 | 二氯甲烷洗(2×80ml) | 3 | 2 | 甲醇洗(2×30m1) | 3 | 3 | 二氯甲烷洗(3×80m1) | 3 | 4 | 50%三氟乙酸和5%1,2-乙二硫醇在70ml二氯甲烷的溶液(2次) | 10 | 5 | 二氯甲烷洗(2×80rnl) | 3 | 6 | 用12.5%三乙胺在70ml二氯甲烷溶液洗2次 | 5 | 7 | 甲醇洗(2×40m1) | 2 | 8 | 二氯甲烷洗(3×80rnl) | 3 | 9 | 加入10mmolBOC保护的氨基酸溶液30ml二甲基甲酰胺或二氯甲烷+10mmolDCC的二氯甲烷溶液 | 30-300 | 10 | 甲醇洗(2×40m1) | 3 | 11 | 用12.5%三乙胺在70ml二氯甲烷的溶液洗 | 3 | 12 | 甲醇洗(2×30m1) | 3 | 13 | 二氯甲烷洗(2×80ml) | 3 |
在步骤13后,取小部分作茚三酮试验。如果试验为阴性,再从第1步开始接上下一个氨基酸;如果试验为阳性或略显阳性,再重复第9到第13步。当全部氨基酸接上后,加入苯甲醚,再在0℃加入氢氟酸,即可使产物从树脂上脱下,并脱去保护基。减压除去氟化氢,用0.1%的乙酸萃取除去树脂,冷冻得到粗品。粗品可用离子交换树脂提纯。 |