HOBt

白色或者灰白色结晶固体状，HOBt分子是一个苯并三氮唑结构，水溶性不高，所以反应过程中不用水相，一般用非水溶剂如四氢呋喃或二氯甲烷。无机酸水溶液可以溶。有机酸里面除了甲酸，乙酸这种能做溶剂，其他的大多室温下一般都不是溶剂（固体)。HOBt中的羟基具有一定的酸性可以在碱性条件下转变为相应的有机盐，也正因为该性质该物质可以和烷基卤代烃发生亲核取代反应生成相应的烷基化衍生物。抑制N-酰基脲副反应的机理
羧酸和缩合剂形成的O-酰基脲（O-acylisourea）活性太高。活性高还不好吗？活性高的同时意味着不稳定，容易发生副反应，生成N-酰基脲（N-acylurea）。且该副反应是不可逆的。加入HOBt，由于其具有很强的亲核性，所以和O-酰基脲反应生成活性酯（activated ester）的速度很快，而O-酰基脲重排成N-酰基脲的速度很慢。这意味着一旦加入HOBt，不稳定的O-酰基脲就会很快被转化为活性酯，而活性酯不会重排成N-酰基脲杂质。也就是通过速度差来抑制N-酰基脲杂质的形成。
抑制消旋的机理
同抑制副反应类似的道理。O-酰基脲不稳定，意味着容易发生消旋。加入HOBt后，可以尽快把它变成相对稳定的活性酯，从而降低消旋的概率。但并不能完全排除消旋的可能性，因为有些底物的活性酯也不稳定，也容易消旋。这就是为什么有时候加入HOBt可以抑制消旋，有时候又没有明显效果的原因。
加速缩合反应的机理
最浅显的理解，如果不加HOBt，从O-酰基脲生成目标酰胺有两条路径（path 2 and 3）。加入HOBt后，就多出一条路径（path 1），总的缩合速度自然增加了。
HOBt 是常用的酰胺缩合剂，能与有机酸形成活性酸再与胺发生酰胺化反应。HOBt 能防止多肽的消旋，提高缩合反应效率。在一个干燥的反应烧瓶中，将水合肼（1.2毫升，25毫摩尔）加入邻硝基氯苯（5毫摩尔）在1-庚醇（10毫升）的溶液里，然后在110-120℃的反应条件下搅拌该溶液5小时。反应结束后，用40%NaOH水溶剂中和反应混合物并在减压下除去多余的肼和1-庚醇。所得的残余物用1M盐酸将pH值调节至3.2-3.5。通过过滤收集沉淀产品，然后用冷却的5%氯化钠水溶液清洗沉淀物，最后通过将所得的沉淀在二氯甲烷和甲醇中进行重结晶提纯即可得到目标产物HOBT分子。
采用pH=7的缓冲溶液，phosphate buffer (K2HPO4/KH2PO4)洗涤。同时萃取剂也很重要，采用乙酸异丙酯作为萃取剂，只需用缓冲溶液洗涤两次就可以去除HOBT，但是采用乙酸乙酯，需要用缓冲溶液洗涤10次。