总RNA提取试剂盒
总RNA提取试剂盒 性质
总RNA提取试剂盒基于改进的异硫氰酸胍/酚一步法(SparkZol法)裂解细胞和灭活RNA酶,总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗、离心的步骤以及去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的RNase Free H2O将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
- 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量无水乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
- 裂解液RL和去蛋白液RE中含有刺激性有害化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
RNase-Free DNase I,缓冲液RDD和RNase-Free ddH2O(管装)置于2-8℃保存:加入β- 巯基乙醇的裂解液RL 4℃可放置一个月;其他试剂室温保存。
1. 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase污染。
2.使用无RNase的塑料 制品和枪头避免交叉污染。
3. RNA在裂解液RL 中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑科和玻璃器皿.玻璃器皿可在150公烘烤4h,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡 10min.然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase.
4。配制溶液 应使用无RNase的水。( 将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度 0.1%(v/v),放置过夜,高压灭菌。)