免疫共沉淀检测服务
免疫共沉淀检测服务 性质
免疫共沉淀检测服务是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的,用于研究蛋白质相互作用的基本方法。原理是以细胞内源性靶蛋白为诱饵,将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育,促进免疫复合物的形成。随后加入能够与靶蛋白抗体结合的protein A/G,形成“结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体”复合物。免疫复合物经纯化后进行凝胶电泳分离,结合Western blot或质谱技术,进而达到纯化目的蛋白质、定性检测抗原或抗体的目的。染色质免疫共沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)是研究体内蛋白质与DNA相互作用的有力工具,利用该技术不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰以及转录因子与基因表达的关系。染色质免疫沉淀技术的原理是:在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起,通过超声或酶处理将染色质切为小片段后,利用抗原抗体的特异性识别反应,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来。染色质免疫沉淀技术一般包括细胞固定,染色质断裂,染色质免疫沉淀,交联反应的逆转,DNA的纯化及鉴定。