虎杖提取物

虎杖提取物是以虎杖Polygonum cuspidatum根或根茎提取的产品，商品提取物通常标化为含白藜芦醇20%、50%、80%、99%。具有保护心血管、保肝利胆、抗癌等作用。虎杖提取物已广泛用于医药、保健品、化妆品等多种行业，国际市场需求空间很大。

虎杖提取物主要含有大黄素 (Emodin)、大黄酚 (Chrysopha)、大黄酸 (Rhein)、大黄素-6-甲醚 (Physcion)、大黄素-6-甲醚-8-β-D-葡萄糖苷 (physcion-8-β-D-glucoside)、大黄素-8-单甲醚 (Questin)、白藜芦醇 (resveratrol)、白藜芦醇苷 (Polydatin)、Resveratrol-4’-O-glucoside、槲皮素 (quercetin)、萘醌及萘苷、香豆素、多糖等。
还含有迷人醇 (Fallacinol)、原儿茶酸 (Protocatechinoc acid)、儿茶素 (Catechin)、2，5-二甲基-7-羟色酮、7-羟基-4-甲基-5-甲基香豆素、决明松-8-O-D-葡萄糖萘苷 (Torachrysone-8-O-D-glucoside)、2-甲氧基-6-乙酰甲基胡桃醌 (2-Methoxy-6-acetylikuglone)、黄酮醇 (Flavonol glycoside)、异槲皮苷 (Isoquercitrin)、葡萄糖欧鼠李苷 (Glucofrangulin)、β-谷甾 (β-Sitosterol) 等。

图1为白藜芦醇苷、白藜芦醇结构式

1.降血脂作用
虎杖提取物中的白藜芦醇和白藜芦醇苷有明显的降低血清胆固醇和甘油三酯的作用。
 2.保肝利胆作用
白藜芦醇苷对脂质过氧化有很强的抑制作用， 从而减少类脂过氧化物在肝脏中的堆积， 减轻肝损伤。
 3.对心血管系统的影响
白藜芦醇苷能扩张血管， 抑制血小板聚集， 改善微循环， 保护血管内皮， 可以使血压下降; 虎杖结晶物能明显抑制ADP、AA和Ca2+诱导的家兔血小板聚集。
 4.抗肿瘤作用
虎杖提取物经口服给药， 对小鼠艾氏腹水癌， 肉瘤癌180、肝癌、乳腺癌、淋巴肉瘤、黑色素瘤及大白鼠瓦克癌均有明显的抑制作用， 抑制率均大于30%。
 5.抗病原微生物作用
白藜芦醇及虎杖提取物对葡萄球菌、链球菌及某些病毒有较强的抑制作用。
 6.镇咳平喘作用
虎杖提取物对组织胺引起的气管平滑肌收缩有抑制作用。
 7.其他作用
白藜芦醇苷与戊巴比妥纳及氨基甲酸乙酯有协同作用，能明显延长小鼠睡眠时间。虎杖提取物还有解热镇痛作用，对烫伤创面有收敛、防止感染和消炎作用。内服对上消化道出血也有止血作用。
 8.毒性作用
小口服虎杖蒽醌衍生物9g/kg， 1周内无死亡;白藜芦醇苷和大黄素对小白鼠腹腔注射的LD50分别为(1000±57.3) mg/kg和(249.5±34.3) mg/kg。

虎杖提取物来源于虎杖，为蓼科植物虎杖 Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. 的干燥根茎和根，为多年生灌木状草本，高可达1m以上，根茎横卧地下，木质黄褐色，节明显。茎直立，圆柱形，表面无毛，但散生多数红色或带紫色斑点，中空，单叶互生，阔卵形或近圆形，长7～12cm，宽5～9cm，先端短尖，基部圆或楔形;叶柄长1～2.5cm;托叶鞘膜质，褐色，早落。花单性，雌雄异株，圆锥花序腋生，花梗较长，上部有翅，结果时增大;雄蕊8枚，雌花子房上部有花柱3枚。瘦果卵形，果3棱，红褐色，光亮，包在翅状的花被中。花期7～9月，果期9～10月。我国各省区均有分布， 资源较丰富。主产于河南、陕西、山东、江苏、浙江、江西、福建、湖南、安徽、广东、广西、四川、云南等地。生于海拔2500米以下的山沟、溪边、林下阴湿处。

图2为虎杖

性状鉴别
根茎横生，呈圆柱形，多分枝，直径6～15mm，红棕色至灰棕色，周围密布须状不定根，根茎下侧生数条粗根;根圆柱形，长约17cm，直径5～15mm，表面红棕色，有纵皱纹，疏生须状细根;质坚硬，切断面黄色至橙红色，射线明显，根茎有髓或中空;味苦、涩。
显微鉴别
根茎横切面：木栓层为5至10数列木栓细胞，棕红色。皮层和韧皮部有纤维束及草酸钙簇晶散在，纤维束由几个至数十个纤维集成。木质部中木纤维发达，导管形大，射线宽2～7列细胞，壁木化，纹孔明显。髓薄壁细胞亦含草酸钙族晶。粉末： ①草酸钙簇晶极多，直径21～110μm，棱角较钝。②皮层纤维呈梭形或长纺缍形，边缘不平整，末端偏斜，长180～336μm，直径24～56μm，壁厚5～6μm，木化，纹孔稀疏。③分枝状石细胞呈纺锤形、类长方形或延长作纤维状，直径56～88μm，壁厚3～10μm，胞腔内含淀粉粒。④木栓细胞棕红色，数层重叠或单个散离，胞腔充满棕红色物，并有不规则纹理。⑤木射线细胞壁木化增厚，纹孔较密。此外，有具缘纹孔导管、淀粉粒等。
理化鉴别
①检查蒽醌类化合物：取虎杖提取物粗粉5g，加乙醇25ml，浸渍2小时，过滤。滤液蒸干，残渣加水约2ml，充分搅拌，放置，取上清液，加氯仿10ml，振摇，取氯仿层，蒸干。残渣加氢氧化钠试液，显樱红色。②检查芪类化合物：取1项下氯仿提取后的水层液，加乙酸乙酯10ml，振摇，取乙酸乙酯层，蒸干。残渣加水约5ml，再用乙醚5ml提取。取乙醚液，蒸干，残渣加1ml乙醇溶解后，点于滤纸上，在紫外灯下观察，显示亮蓝色荧光。③取本品粉末5g，用甲醇回流提取，提取液浓缩备点样用。以硅胶G为吸附剂，苯-无水乙醇(8：2)为展开剂，大黄素、大黄素-8-葡萄糖甙和大黄酚为对照品，展距13cm，氨蒸汽熏后，样品在与标准品相应Rf值处，显相同樱红色斑点。

1.酸解试验
吸取70%醇提液，每份10ml，分别加盐酸至一定浓度，置沸水浴上回流，然后加甲醇稀释并定容至100ml，分别测定浓度，结果见图3。

图3为酸解试验条件与结果
上述试验表明，70%乙醇提取液加盐酸至1%，回流3.25小时的白藜芦醇浓度较高，增大盐酸浓度或加长回流时间，浓度均下降。
2.酸解液的中和、浓缩和干燥试验
取70%乙醇提取液加盐酸至1%，回流3.25小时所得的酸解液，抽滤;吸取滤液五份， 每份90ml， 分别加入等当量、等当量的-15%、-5%、+5%、+15%的20%氢氧化钠溶液。每份中， 取5ml加甲醇稀释并定容至25ml; 另取两份各25ml， 一份水浴蒸发1.5小时， 加甲醇稀释并定容至100ml; 另一份水浴蒸发1.5小时， 真空干燥 (75℃) 1.5小时， 加70%乙醇25ml， 超声， 加甲醇稀释定容至100ml，测定浓度 (浓缩物、干燥物均折算为原体积溶液， 单位：mg/ml)，结果见图4。

图4为酸解液的中和、浓缩和干燥试验
上述试验表明酸解液不论在中性、酸性或碱性条件下继续加热均导致含量下降。
3.酶解提取方法
由于虎杖中含有白藜芦醇的苷类， 进行酸解往往造成白藜芦醇的破坏， 故采用酶解法将苷水解为白藜芦醇， 虎杖提取物产品收率可提高1倍以上。酶解法包括外源酶和自有酶法， 外源酶即添加复合酶， 在一定温度、酸碱度条件下进行酶解。自有酶法是利用虎杖中自有酶将白藜芦醇苷类水解为白藜芦醇， 由于不需添加外源酶， 具有操作简单、成本低等优点。

1.薄层鉴别
取虎杖药材粉末0.1g或相当量的提取物粉末， 加甲醇10ml， 超声提取15分钟， 滤过， 滤液蒸干， 残渣加2.5mol/L硫酸溶液5ml， 加热水解30分钟， 放冷， 用氯仿提取2次， 每次5ml， 合并氯仿液， 蒸干， 残渣加氯仿1ml使溶解， 作为供试品溶液。另取大黄素、大黄素甲醚对照品， 分别加甲醇制成1mg/ml的溶液， 作为对照品溶液。吸取上述供试品溶液各4μl， 对照品溶液1μl， 分别点于同一硅胶G薄层板上， 以石油醚 (30-60℃)-甲酸乙酯-甲酸 (15：5：1) 的上层溶液作为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 置紫外灯光下(365nm)下检视。在供试品色谱中， 在与对照品色谱相应的位置上， 显相同的橙黄色荧光斑点; 置氨蒸汽中熏后， 日光下检视， 斑点变为红色。
2.用HPLC法测定虎杖提取物中白藜芦醇的含量
色谱条件与系统适应性试验：ODS2 C18 5u 4.6mm×200mm色谱柱; 乙腈-水 (23：77)为流动相; 流速： 1ml/min; 检测波长： 303nm。理论塔板数以白藜芦醇计不低于2500。
对照品溶液的制备： 精密称取白藜芦醇10mg， 用甲醇配制成0.05mg/ml， 即为对照品溶液。
供试品溶液的制备： 精密称取提取物粉末适量， 置50ml容量瓶中， 加35ml甲醇， 超声提取15min， 放置至室温， 定容， 用0.45μm滤膜过滤， 即为供试品液。
测定法：将样品供试液、对照品溶液各10μl分别注入HPLC仪 (见图5)， 面积外，标法计算含量。

图5为虎杖提取物的HPLC图

虎杖提取物性微寒，味微苦，具有清热利湿、活血通经、化痰止咳的作用，可用于急性黄疸型传染性肝炎、血瘀闭经、风湿关节痛、筋骨痛、跌打损伤、胆结实、淋症、气管炎以及烧伤等症。
虎杖提取物具有很强的生物活性，可用于治疗小儿肺炎、急性病毒性肝炎、乙型肝炎、高血脂症、消化道止血、白细胞减少、烧烫伤、宫颈糜烂、砂淋、血淋、小便涩痛等症。

1.肝炎：虎杖提取物治疗急性黄疸型肝炎和慢性乙型肝炎，单方、复方对降酶退黄均有较好的疗效。
 2.高脂血症：虎杖治疗高脂血症，对升高的血清胆固醇和三酰甘油的下降都有较好的疗效。
 3.上消化道出血：虎杖粉和虎杖提取物对对中小量胃十二指肠出血有很好的止血效果。
4.关节炎：虎杖酒剂治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、骨关节炎、腰椎肥大均有显著的疗效。
 5.银屑病：虎杖苷片治疗银屑病有较好的疗效。
 6.白细胞减少症：单方、复方虎杖治疗白细胞减少症有较好的疗效。对血小板减少也有效果。
 7.慢性气管炎和肺炎：复方虎杖治疗慢性支气管炎，对咳嗽和炎症有较好的疗效。复方虎杖注射液静脉滴注对急性肺炎和小儿肺炎有显著的效果。
 8.烧伤：虎杖煎液或虎杖粉外敷治疗烧伤、烫伤无感染者有显著的效果，对有感染者也有显著的效果。对有绿脓杆菌感染者也能使创而愈合。
 9.其他：治疗宫颈糜烂、霉菌性阴道炎、单纯疱疹性角膜炎、各种创伤等都有较好的疗效。

虎杖提取物在我国应用很广，《神农本草经》将其列为中品，我国历版药典均有记载，其单复方制剂也很多。最近研制的虎杖片用于降血脂，升白血球，用于胆固醇和甘油三酯过高等症;虎杖排石六号汤用于湿热型胆结石病;虎杖提取物或虎杖研粉口服可用于上消化道出血;虎杖蒽醌或其制剂用于治疗急慢性肝炎、白细胞减少症;虎杖鞣质用于各种烧伤创面。同时，虎杖还制成了各种虎杖冲剂、虎杖糖浆、虎杖针等制剂。虎杖提取物主要用于疮口修复和美容产品的原料。