NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞
中文名称 | NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞 |
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中文同义词 | NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞 |
英文名称 | NIH3T3 mouse embryonic fibroblast |
英文同义词 | |
CAS号 | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS号 | |
相关类别 | 细胞-细胞系 |
Mol文件 | Mol File |
结构式 |
NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞 性质
NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞是1962年Todaro G和Green H从分离的瑞士小鼠胚胎中建立的;该细胞的生长受接触性抑制,汇合状态的单层细胞密度为40000个细胞/平方厘米;检测结果显示该细胞鼠痘病毒阴性;在塑料瓶中生长较好,在某些玻璃表面上可能状态不佳;细胞生长饱和时其密度可以达到约50000 cells/cm2。
NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。