植物细胞转染试剂盒
植物细胞转染试剂盒 性质
植物细胞转染试剂盒可以将质粒、Cas9/sgRNA等蛋白和RNA转染进入植物原生质体内。经转染的植物原生质体经过一段时间的培养后,可用于检测外源基因的表达和功能、也可以观测到目的基因的表达调控。本试剂盒采用优化后的聚乙二醇转染方法,借助聚乙二醇短时间内对原生质体产生的冲击效应,使质粒DNA、RNA或蛋白能够进入原生质体,不仅使用起来十分便捷,同时还具有超高的转染效率.在2ml的圆底离心管中加入20μg
p35SPPDK-EGFP-Flag(植物用绿色荧光蛋白),加入100μl制备好的原生质体,轻柔混匀后加入110μl当日配制好的转染试剂溶液,轻柔混匀,室温静置5min后加入440μl终止液,轻轻颠倒混匀,室温100g离心1min,去除上清,再加入0.5ml终止液,轻柔重悬原生质体,室温100g离心1min后,尽量去除上清,收集原生质体。加入1ml培养液,小心重悬原生质体后将其平置25℃培养过夜(约16h),次日于荧光显微镜下检测EGFP荧光信号。