活性蛋白提取试剂盒
| 中文名称 | 活性蛋白提取试剂盒 |
|---|---|
| 中文同义词 | 活性蛋白提取试剂盒 |
| 英文名称 | Active protein extraction kit |
| 英文同义词 | |
| CAS号 | |
| 分子式 | |
| 分子量 | 0 |
| EINECS号 | |
| 相关类别 | 细胞生物学-蛋白提取/检测 |
| Mol文件 | Mol File |
| 结构式 |
活性蛋白提取试剂盒 性质
活性蛋白提取试剂盒用于从动物组织中提取有活性的总蛋白，该试剂由一种温和的非离子型去污试剂、缓冲试剂和氯化钠等组成。采用匀浆或超声破碎时，该试剂高效提取的蛋白质可以尽可能地保持活性，可以用于1D和2D电泳、免疫共沉淀、Pull
down、EMSA、报告基因分析（Luciferase、β-galactosidase、Chloramphenicol
Acetyltransferase等）、蛋白质激酶分析（PKA、PKC、Tyrosine Kinase等）、酶免分析（Western
Blot、ELISA、RIA）、蛋白质纯化等实验，含有的去污试剂可通过透析去除。
1.将100 mg组织剪切成小块，尽量去除脂肪组织和结缔组织等非目的组织，加入适量的预冷的1X PBS于4°C，700 g（3000
rpm）离心3 min，弃掉上清，重复洗涤两次。
2.向以上洗涤后的组织中加入1 mL预冷的抽提试剂（使用前向每1 mL抽提试剂中加入1μl DTT，10μl PMSF，1μl蛋白酶
抑制剂），置玻璃匀浆器冰上均质30~50次至组织完全成匀质状液体无明显组织小块。
3.最大速度涡旋振荡10 sec，冰上放置20 min，期间取出振荡3~5次，再于4°C，12830g（12000 rpm）离心10 min以沉
淀组织或细胞碎片，转移上清为组织活性总蛋白部分，分装并保存于-80°C，用于下游实验。