人肝星形细胞
人肝星形细胞 性质
人肝星形细胞呈上皮细胞样,多角形,贴壁生长,倍增时间3-4天。其能够在血清浓度极低(1%FBS)的条件下生长,并具有高转染性,使用TGF-β1可诱导LX-2细胞转为化肌成纤维细胞。
1.人肝星形细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2.4 min 1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬人肝星形细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
人肝星形细胞LX-2细胞系是2004年取HSC细胞转染SV40大T抗原而建立的永生化细胞系,其保留了肝星状细胞信号传导、神经元基因表达、视黄醇代谢和纤维化形成的关键特性,如表达βPDGF-R,Ob-RL,DDR2等,是非常适合研究人类肝纤维化的模型。