人胚肺二倍体细胞
人胚肺二倍体细胞 性质
人胚肺二倍体细胞是一株由人胚胎肺组织分离鉴定的有限细胞系,传代25代,可支撑多种人源病毒的复制,广泛用于病毒学基础研究。二倍体是指由受精卵发育而来,且体细胞中含有两个染色体组的生物个体。另外,由二倍体的体细胞培育而来的植物,以及由只含一组染色体组的单倍体经过染色体数目加倍处理而来的植物也叫二倍体。
二倍体细胞(diploid cell)具有有限的增殖能力,此增殖能力决定于供体的物种与年龄,如小鼠细胞分裂约12次,鸡细胞分裂约25次,成年人成纤维细胞体外能倍增20代,胚胎成纤维细胞能倍增50代,故可采用分离的二倍体细胞观察药物对寿命的影响,由于体外细胞的衰老与体内的衰老有一定相关性,可预测此药物有无抗衰老作用。
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%)。即可进行传代,具体步骤如下:
a,弃去培养液,用PBS洗1-2次。
b,向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,吸取胰蛋白酶,加含有6ml含10%血清的培养液,轻轻吹打细胞。
c,加入等量的的培养液,轻轻吹打混匀后吸出一半,分到新的培养
d,传代比例:1:2-1:3