尿素琼脂培养基基础

尿素琼脂培养基基础用于鉴别肠道菌尿素酶试验，配方（每升）：蛋白胨1g；氯化钠5g；葡萄糖1g；磷酸二氢钾2g；酚红0.012g；琼脂12g；最终pH7.2±0.2。蛋白胨提供碳源和氮源；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸二氢钾是缓冲剂；具有尿素酶的细菌分解培养基中的尿素，产生大量的氨，使培养呈碱性，酚红指示剂在pH6.8时呈黄色，pH8.1呈粉红色；琼脂是培养基的凝固剂。

1、称取本品21g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，待冷却至50—55℃，每200mL培养基加入经过滤除菌的20%的尿素溶液20mL或5支(029100)40%的尿素溶液共10mL，尿素的最终浓度为2%。分装无菌试管，制成斜面。

2、挑取待检菌的新鲜纯培养物，浓密地涂布在尿素琼脂斜面上，置36±1℃培养24h。

3、于2—4h及24h各观察一次结果。培养基呈现红色时为阳性反应，颜色不变者为阴性反应。如为阴性可继续培养观察至4d。