HUT102细胞系|人T淋巴瘤细胞

1.吸取并弃掉培养瓶中培养基。

2.加入1.0 mL 0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37℃培养箱中孵育，直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟（此处为12.5 cm2培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。

3.加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶，并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落，并使细胞分散。

4.离心200x g/5 min，去除上清后，取适量的培养基将细胞重悬,取适量悬液置于新的培养瓶中，并加入新鲜细胞完全培养基至总体积为4mL。

5.将细胞置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。

1.将冻存管置于37℃水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染，确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速，大约2分钟。

2.一旦冻存管中液体融化后，立即取出，采用70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始，后续操作须在生物安全柜中完成。

3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中，离心200×g/5-10 min，用真空泵去除含有冻存液的上清。

4.用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率，请将培养基在37℃水浴预热后使用。

5.将细胞置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。