琥珀酸脱氢酶

琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase，SDH)又称琥珀酰辅酶Q还原酶，是一种关键的线粒体酶复合物，位于线粒体内膜，在氧化磷酸化和细胞内氧传感和信号传导中起重要作用，是三羧酸循环和有氧电子传递呼吸链的交叉点，其在三羧酸循环中催化琥珀酸盐氧化为延胡索酸盐，并参与电子转运链，从而在细胞代谢中扮演着重要的角色。SDH由黄素酶SDHA（the flavoprotein SDHA）、硫酸化铁酶SDHB（the ironsulfur protein SDHB）、整合膜蛋白SDHC（the integral membrane protein SDHC）和整合膜蛋白SDHD（the integral membrane protein SDHD）4个亚单位构成，可将其合称为SDHx，分别由相应核基因编码，其中SDHA和SDHB是亲水蛋白，形成酶催化域中心，而SDHC和SDHD是疏水蛋白，可将SDH四聚体复合物锚定于线粒体内膜上，同时也是辅酶Q的结合位点。此外SDH也是一种公认肿瘤抑制基因。SDH复合物中任何一个亚单位缺失都会造成该复合物不稳定性，从而影响其生理功能。琥珀酸脱氢酶检测的方法主要包括光度法、电化学法和荧光法等。光度法是最常用的检测方法之一，基于琥珀酸脱氢酶催化反应中产生的NADH的吸光度变化。通过测定NADH的吸光度，可以间接评估琥珀酸脱氢酶的活性和样品中琥珀酸的含量。电化学法则是利用琥珀酸脱氢酶催化反应中产生的电流变化来定量分析琥珀酸的含量。荧光法则是利用琥珀酸脱氢酶催化反应中产生的荧光信号来检测琥珀酸的含量。
琥珀酸脱氢酶检测试剂盒：琥珀酸脱氢酶催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸，通过吩嗪二甲酯硫酸（PMS）递氢将2,6-二氯酚靛酚（DCPIP）还原，2,6-二氯酚靛酚在600 nm处具有特征吸收峰，通过吸光度的变化即可测定2,6-DCPIP的还原速度，进而表征琥珀酸脱氢酶的活性。

原理：琥珀酸脱氢酶活性比色检测试剂盒为测定多种组织、细胞和分离线粒体中的 SDH 活性提供了一种简单、灵敏的程序。通过产生与存在的酶活性成比例的 600nm 吸光度的产物来确定 SDH 活性。一个单位的 SDH 是在 pH7.2，25℃ 下每分钟产生 1.0μmole DCIP 的酶量。琥珀酸脱氢酶反应Pearson二甲亚砜法、Nachlas硝基蓝四唑法、Gobel改良Rutenberg Waoman Seligman法等，其中以Nachlas硝基蓝四唑法较常用。主要用于琥珀酸脱氢酶存在于所有有氧呼吸的细胞，其中以心肌、肾曲管上皮细胞及肝细胞含量最丰富，它牢固结合于线粒体膜内，最适pH为7.6。此酶对固定剂很敏感，因此要鲜组织低温恒冷切片。