P3X63AG8.653 小鼠骨髓瘤细胞
P3X63AG8.653 小鼠骨髓瘤细胞 性质
B淋巴细胞;浆细胞;骨髓瘤悬浮;淋巴母细胞这株细胞能抗8-氮杂鸟嘌呤但对HAT敏感。 可以用作杂交瘤时的融合配体。 能生成但不分泌免疫球蛋白。 据报道它是由于缺失了3-酮类固醇还原酶活性的胆固醇营养缺陷型。P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤细胞)“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%。接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力zui好时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。1.接种:用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液,以每孔1000-10000个接种到96孔板,每孔体积200ul.
2.P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤细胞)培养:同一般培养条件,培养3-5天(可根据试验目的和要求决定培养时间)。
3.呈色:培养3-5天后,每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS 配)20ul. 继续孵育4小时,终止培养,小心吸弃孔内培养上清液,对于悬浮需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO,振荡10分钟,使结晶物充分融解。
4.比色:选择490nm波长,在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值,记录结果,以时间为横坐标,吸光值为纵坐标绘制P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤细胞)生长曲线。
2.P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤细胞)培养:同一般培养条件,培养3-5天(可根据试验目的和要求决定培养时间)。
3.呈色:培养3-5天后,每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS 配)20ul. 继续孵育4小时,终止培养,小心吸弃孔内培养上清液,对于悬浮需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO,振荡10分钟,使结晶物充分融解。
4.比色:选择490nm波长,在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值,记录结果,以时间为横坐标,吸光值为纵坐标绘制P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤细胞)生长曲线。