4-羟乙基哌嗪乙磺酸（简称HEPES），分子式为C8H18N2O4S。分子结构中既含有酸性的磺酸基（－SO3H），又含有两个碱性叔胺氮，所以呈现两性，可用来配制两性离子缓冲液。关于HEPES 缓冲溶液的配制，不同的文献资料有不同的说法。根据用途，一般有三种，HEPES缓冲液，HEPES缓冲盐溶液，2×HEPES缓冲盐溶液，三种配制方法总结如下：
一、HEPES缓冲液
HEPES缓冲液通常由HEPES和碱（如NaOH）组成。以下是制备HEPES缓冲液的步骤：
（1）将119.15克HEPES溶解在400毫升蒸馏水中，确保完全溶解。
（2）使用0.5~1M的NaOH水溶液逐渐滴加，调节溶液的pH至所需范围。需要注意的是，HEPES的有效pH缓冲范围是6.8-8.2。
（3）将溶液定容至500毫升，使用蒸馏水进行定容。
（4）HEPES缓冲液在生物学实验中常用于细胞培养、蛋白质表达等需要维持稳定pH值的情况下。其优点在于能够在中性pH条件下工作，不会对生物样品产生毒性。
二、HEPES缓冲盐溶液
除了HEPES和碱外，HEPES缓冲盐溶液中还包含其他离子。以下是制备HEPES缓冲盐溶液的步骤：
（1）将6.5克HEPES、8.0克NaCl、0.198克Na2HPO4·7H2O分别称取。
（2）使用0.5M NaOH水溶液逐渐滴加，调节溶液的pH至所需范围。
（3）将溶液定容至500毫升，使用蒸馏水进行定容。
（4）HEPES缓冲盐溶液通常用于一些需要特定离子浓度的实验，例如细胞-细胞黏附实验中含钙、镁离子的需要。
三、 2×HEPES缓冲盐溶液
这是一种相对复杂的HEPES缓冲体系，适用于一些特定的实验需求。以下是制备2×HEPES缓冲盐溶液的步骤：
（1）将1.6克NaCl、0.074克KCl、0.027克Na2HPO4.2H2O、0.2克葡聚糖(glucan or dextran)和1克HEPES分别称取，加入90毫升蒸馏水中，确保溶解。
（2）使用0.5M NaOH水溶液逐渐滴加，调节溶液的pH至所需范围。
（3）将溶液定容至100毫升，使用蒸馏水进行定容。
（4）2×HEPES缓冲盐溶液适用于一些特殊的实验设计，例如在细胞培养中需要维持特定离子浓度。
HEPES 缓冲溶液具有对细胞无毒性、不易穿过生物膜、不参与细胞内生化过程等特点，所以在生化实验中具有广泛的应用。湖南汇百益作为HEPES的供应商，不仅拥有先进的生产设备和严格的质量控制体系，确保所提供的HEPES产品具有高纯度和稳定的性能。同时无论是在产品选择、应用指导还是实验设计方面，汇百益专业团队都能够为客户提供及时的帮助和解决方案。如果您有相关需求，欢迎随时联系我们购买！