AD-苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)试剂盒样本测定的准备:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为1000~5000:1的比例(建议2000万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
试剂的组成和配制:
试剂一、提取液60 mL×1瓶,在4℃保存;
试剂二、液体50 mL×1瓶,在4℃保存;
试剂三、粉剂×2支,-20℃保存;临用前加入300μL蒸馏水,充分溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四、粉剂×2支,-20℃保存;临用前加入300μL蒸馏水,充分溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。