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QA-Bio/艾美捷神经氨酸酶Au:精准切割唾液酸残基,助力生物医药研究
发布日期:2024/7/1 16:04:15发布人:武汉艾美捷科技有限公司

α-(2-3,6,8,9) 神经氨酸酶Au能够从复杂碳水化合物和糖蛋白中切割所有非还原末端的唾液酸残基。不同连接方式的相对切割速率为:α(2-6) > α(2-3) > α(2-8), α(2-9)。

 

此外,该酶还能切割分支唾液酸(连接到内部残基)。这一特性使其在神经氨酸酶中独一无二。切割分支残基可能需要较高浓度的酶和较长的孵育时间。若仅切割非还原末端的α(2-3)非分支唾液酸残基,请使用唾液酸酶SP,编号E-S007。

 

α-(2-3,6,8,9) 神经氨酸酶是从产尿素棒状杆菌的一个克隆中分离出来的。该酶已使用寡糖标准品进行了广泛的表征。

31.png

艾美捷QA-Bio-神经氨酸酶Au:

来源 来自大肠杆菌中产尿素棒状杆菌的重组。

EC 3.2.1.18

内容 20 mM Tris-HCl, 25 mM NaCl, pH 7.5 中的神经氨酸酶

随附20 µL 和 60 µL 包装大小:

5倍反应缓冲液 250 mM 磷酸钠,pH 6.0

比活性 >135 U/mg

活性 >5 U/ml

分子量 70,000 道尔顿

pH 范围 4.5-7,最佳 pH 6.0

推荐的缓冲液浓缩物为标准底物提供酶活性的最佳pH。如果由于糖蛋白的溶解度或活性要求而在非Z佳pH下进行糖苷酶处理,预计酶活性会有所降低。

 

建议用法:

向管中添加最多100 μg的糖蛋白或1 nmol的寡糖。

加水至14 μL。

添加4 μL 5X 反应缓冲液。

添加2 μL α-(2-3, 6,8,9) 神经氨酸酶。

在37°C下孵育1小时。

如果天然和去唾液酸化的蛋白质之间的大小差异足够大以便于检测,可以通过SDS-PAGE监测去唾液酸化。

注意:如果存在分支唾液酸,则需要更长的孵育时间。

 

特异性 切割所有非还原末端的分支和非分支唾液酸

比活性 定义为在37℃,pH 5.0条件下,每分钟产生1 µmole的甲基伞形酮所需的酶量,从MU-NANA [2′-(4-甲基伞形基)-α-D-N-乙酰神经氨酸]。

储存 将酶存放在4℃。

纯度 每批α-(2-3,6,8,9) 神经氨酸酶都经过以下测试以检测污染的蛋白酶;10 μg的变性牛血清白蛋白与2 μL的酶孵育24小时。经处理的BSA的SDS-PAGE分析显示没有降解迹象。

生产宿主菌株经过广泛测试,不产生任何可检测的糖苷酶。

稳定性 妥善储存至少12个月稳定。几天暴露在常温下不会降低活性。酶在37℃下至少保持一周活性。

 

QA-Bio-神经氨酸酶Au文献参考:

Corfield, A. P., H. Higa, J. C. Paulson and R. Schauer. The specificity of viral and bacterial sialidases for alpha(2-3) and alpha(2-6)-linked sialic acids in glycoproteins. Biochim Biophys Acta 744: 121-12 6 (1983).

Dwek, R. A., C. J. Edge, D. J. Harvey, M. R. Wormald and R. B. Parekh. Analysis of glycoprotein-associated oligosaccharides. Ann Rev Biochem 62: 65-100 (1993).

Kobata, A. Use of endo- and exoglycosidases for structural studies of glycoconjugates. Anal Biochem 100: 1-14 (1979).

Ohta, Y., Y. Tsukada and T. Sugimori. Purification and properties of neuraminidase isoenzymes in Arthrobacter ureafaciens mutant. J Biochem (Tokyo) 106: 1086- 1089 (1989).

Prime, S., J. Dearnley , A. M. Venton, R. B. Parekh and C. J. Edge. Oligosaccharide sequencing based on exo- and endoglycosidase digestion and liquid chromatographic analysis of the products. J Chromatogr A 720: 263-274 (1996).

Uchida, Y., Y. Tsukada and T. Sugimori. Enzymatic properties of neuraminidases from Arthrobacter ureafaciens. J Biochem (Tokyo) 86: 573-58 5 (1979).

 

艾美捷科技是QA-Bio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

 

https://www.amyjet.com/news/QA-Bio-new.shtml


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