PluriSelect-多珠 使用非磁性单分散微粒(珠粒)分离细胞混合物。它们的表面涂有针对靶细胞表面特定结构的单克隆抗生素(mAb)。在孵育过程中,悬浮的靶细胞将与多聚珠结合 并且可以在以后通过多菌株分离 (尺寸除外)暂停。珠子比细胞大,因此不能被它们吞噬。不需要对血液进行预处理(例如密度离心、红细胞溶解或其他目标浓度) 应仅用于研究用途。
PluriSelect-Maxi M-pluriBead试剂盒包含100ml 10xWash缓冲液、稳定缓冲液、孵育缓冲液、分离激活缓冲液、10x1.8ml分离缓冲浓缩液、10 M-pluriStrainer、10漏斗、10连接器环。
艾美捷PluriSelect-Maxi M-pluriBead试剂盒:
货号 70-50010-22
规格 10
样品料 Whole Blood, PBMC, Buffy Coat, Cord Blood, Bone Marrow, Primary Cell Solution
纯度 >90%
储存条件 Room Temperature; Buffer 4-8 °C; Buffer D -20°C
规范性声明 For research use only. Not for use in diagnostic procedures,
通用建议:
确保试剂盒完好无损,缓冲液没有泄漏。不要使用损坏的试剂盒。在处理多个样本时,避免将样本转移到错误的混合容器、筛网或管中。确保所有容器、筛网或管都使用永久性笔正确标记。除非另有说明,本协议的所有步骤应在室温下进行。
安全建议:
在处理生物和化学材料时,始终穿着实验室外套、一次性手套和防护眼镜,以防止感染(例如由HIV或乙型肝炎病毒引起)并避免受伤。如果手套与样本接触,请立即更换手套。
储存与稳定性:
pluriBead悬浮液、洗涤缓冲液、缓冲液A(稳定缓冲液)、缓冲液B(孵育缓冲液)和缓冲液C(分离激活缓冲液)应存放在2-8°C。缓冲液D(分离浓缩液)必须在-20°C下冷冻。正确储存和处理,pluriBead悬浮液和缓冲液在标签上注明的有效期前都是稳定的。储存条件不当会导致分离结果较差。使用前彻底重新悬浮pluriBead悬浮液。避免pluriBead悬浮液和提供的缓冲液受到细菌或真菌污染。
防止细胞压力和污染:
将样本移液至混合容器时,避免容器边缘的污染。在液体转移之间始终更换移液管吸头。使用过滤型移液管吸头。避免用移液管吸头触碰筛网的网眼。避免与试剂盒组件的内部无菌表面有任何不必要的接触。特别是,混合容器和筛网的表面应保持无菌,以避免交叉污染。
洗涤:
小型悬浮M-pluriBead 悬浮液<=1ml
• 将M-pluriStrainer连接到一个无菌的50毫升离心管上。筛网的较大开口必须朝上。
• 样品超过4毫升时可选择:将提供的漏斗放在筛网上。筛网上液体的Z大应用体积增加到15毫升。
• 加入1毫升洗涤缓冲液(已稀释,见步骤1.1),以平衡筛网并支持分离。
• 将样品(超过4毫升)倒入pluriStrainer。未结合的细胞通过筛网流入离心管中,与珠子结合的目标细胞留在筛网上。流过液可以用于进一步的细胞分离。
• 建议:使用5毫升移液管(不要使用血清学移液管)。
• 以2毫升的步骤洗掉pluriStrainer/漏斗上的珠子-样品痕迹并丢弃漏斗。
• 以2毫升的步骤1次洗涤缓冲液充分洗涤筛网。
• 以圆形运动方式洗涤,避免只洗筛网的中间。我们建议总共至少使用20毫升洗涤。注意离心管下不要超过45毫升的样品/洗涤缓冲液!如有必要,请使用多个管子。现在,筛网上与珠子结合的目标细胞已准备好进一步使用。
大型悬浮M-pluriBead悬浮液 >1毫升
• 根据应用的pluriBead悬浮液量,使用多个M-pluriStrainers。每个筛网都连接到一个无菌的50毫升离心管上。较大的开口必须朝上。
• 将提供的漏斗放在筛网上。筛网上液体的Z大应用体积增加到15毫升。
• 每个漏斗分别加入1毫升洗涤缓冲液以平衡筛网并支持分离。
• 根据漏斗的数量将样品分割,并小心地将样品倒入其中。未结合的细胞通过筛网流入离心管中,与珠子结合的目标细胞留在筛网上。流过液可以用于进一步的细胞分离。
• 建议:使用5毫升移液管(不要使用血清学移液管)。
• 以2毫升的步骤洗掉漏斗上的珠子-样品痕迹并丢弃漏斗。
• 以2毫升的步骤充分洗涤筛网。
• 以圆形运动方式洗涤,避免只洗筛网的中间。我们建议总共至少使用20毫升*洗涤。注意筛网下的管子不要超过45毫升的样品/洗涤缓冲液!如有必要,请使用多个管子。现在,筛网上与珠子结合的目标细胞已准备好进一步使用。分离后,样品可以合并。
艾美捷科技是pluriSelect的特约代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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