"CHL/IU细胞：中国仓鼠肺细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
购买细胞注意事项：１)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系；２)仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等；３)用７５%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次；４)建议客户收到细胞后前３天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。【细胞传代操作步骤】一、贴壁细胞传代：１)提前将培养基、PBS放入３７℃水浴锅内预热，用７５%酒精擦拭后再放入超净台内；２)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞；３)加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，３７℃孵育，每隔２~３min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用；４)用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡；５)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。二、悬浮细胞传代：１)将细胞悬液转移到无菌离心管内，１０００rpm离心５min；２)弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液；３)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养。
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞培养基应用选择：选择培养基没有一定的标准，有几点建议可供参考：(１)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献，或在购买细胞株时咨询。(２)其它实验室惯用的培养基不妨一试，许多培养基可以适合多种细胞。(３)根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI１６４０。(４)用多种培养基培养目的细胞，观察其生长状态，可以用生长曲线、集落形成率等指标判断，根据实验结果选择培养基，这是最客观的方法，但比较繁琐。以下是部分细胞常用的培养条件：２９３人胚胎肾细胞培养条件：MEM,１０%热灭活马血清；IMR-９０人肺成纤维细胞培养条件：MEM,１０%胎牛血清和NEAA；W１-３８人胚胎肺成纤维细胞培养条件：MEM,１０%胎牛血清；A５４９人肺癌上皮细胞培养条件：F-１２K,１０%胎牛血清；A４３１人表皮癌细胞培养条件：DMEM,１０%胎牛血清；BHL-１００人乳房上皮细胞培养条件：McCoy'５A, １０%胎牛血清；BeWo人绒毛癌上皮滋养层细胞培养条件：F-１２K,１５%胎牛血清；Caco-２人结肠腺癌上皮细胞培养条件：MEM,１０%胎牛血清和NEAA；Chang人肝脏上皮细胞培养条件：BME,１０%小牛血清；HCT-１５人结肠直肠腺癌上皮细胞培养条件：RPMI-１６４０,１０%胎牛血清；HEp-G２人肝细胞癌上皮细胞培养条件：MEM,１０% 胎牛血清和NEAA；HEp-２人喉癌上皮细胞培养条件：MEM,１０% 胎牛血清;或RPMI-１６４０,１０%胎牛血清；HT-２９人结肠腺癌上皮细胞培养条件：McCoy'５A,１０%胎牛血清；JEG-２人绒毛膜癌上皮细胞培养条件：MEM,１０%胎牛血清；KB人口腔癌上皮细胞培养条件：MEM,１０%胎牛血清和NEAA；Saos-２人骨肉瘤上皮细胞培养条件：McCoy'５A,１５%胎牛血清；WI-３８人胚胎肺上皮细胞培养条件：BME,１０%胎牛血清；WISH人羊膜上皮细胞培养条件：BME, １０%胎牛血清；HUVEC人脐带内皮细胞培养条件：F-１２K,１０%胎牛血清和肝素１００ug/ml；IM-９人骨髓瘤成淋巴细胞培养条件：RPMI-１６４０,１０%胎牛血清；Daudi人淋巴瘤细胞培养条件：RPMI-１６４０,１０%胎牛血清；Clone M-３小鼠黑素瘤上皮细胞培养条件：F-１０,１５%马血清和２.５%胎牛血清；BHK-２１仓鼠肾成纤维细胞培养条件：GMEM,１０%胎牛血清或MEM,１０%胎牛血清和NEAA；CHO-K１仓鼠卵巢上皮细胞培养条件：F-１２,１０%胎牛血清；IEC-６大鼠正常小肠上皮样培养条件：DMEM,５%胎牛血清,胰岛素０.１μg/ml；COS-１猴肾成纤维细胞培养条件：MEM,１０%胎牛血清；COS-３猴肾成纤维细胞培养条件：MEM,１０%胎牛血清；COS-７猴非洲绿猴肾成纤维细胞培养条件：MEM,１０%胎牛血清
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