在免疫测定领域，夹心法作为一种经典且高效的检测方法，凭借其独特的原理和显著的优势，在生物样本分析中发挥着重要作用。根据检测物质的不同，夹心法可分为双抗体夹心法和双抗原夹心法，这两种方法在临床诊断、科研检测等多个场景中广泛应用。了解它们的原理、优缺点，有助于我们更好地选择合适的检测方法，提升检测的准确性和可靠性。
一、双抗体夹心法
1、反应原理
双抗体夹心法以抗原为检测目标。在检测过程中，首先将捕获抗体固定在固相载体上，当含有待测抗原的样本加入后，样本中的待测抗原会与固相载体上的捕获抗体发生特异性结合，形成“固相载体 - 捕获抗体 - 待测抗原”复合物。随后，通过清洗步骤去除未结合的杂质，再加入标记抗体。标记抗体同样能够特异性地识别并结合待测抗原的另一个抗原表位，从而形成“固相载体 - 捕获抗体 - 待测抗原 - 标记抗体”双抗体夹心复合物。最终，通过检测标记抗体所携带的信号，如酶催化底物产生的显色信号或发光物质发出的光信号，且该检测信号与样本中待测抗原的量成正相关，以此实现对待测抗原的定量分析。
2、应用场景与优势
双抗体夹心法在传染病抗原检测、肿瘤标志物检测等领域应用广泛。由于使用了两种不同的特异性抗体，该方法具有极高的灵敏度，能够检测出样本中微量的抗原。其特异性也非常出色，两种抗体的双重识别机制有效降低了非特异性结合的概率，减少了假阳性结果的出现。此外，双抗体夹心法的信号值和抗原浓度值之间呈现良好的比例关系，使得检测曲线宽、线性好，便于准确地进行定量分析。
二、双抗原夹心法
1、反应原理：双抗原夹心法主要用于检测样本中的抗体。其原理是将捕获抗原固定在固相载体上，当样本中的待测抗体加入后，待测抗体与固相载体上的捕获抗原发生特异性结合，形成“固相载体 - 捕获抗原 - 待测抗体”复合物。经过清洗去除未结合的物质后，再加入标记抗原。标记抗原同样能够特异性地与待测抗体结合，从而形成“固相载体 - 捕获抗原 - 待测抗体 - 标记抗原”双抗原夹心复合物。通过检测标记抗原所产生的信号强度，即可得知样本中待测抗体的含量，且检测信号与样本中待测抗体的量成正相关。
2、适用范围与特点：双抗原夹心法在自身免疫性疾病抗体检测、传染病抗体筛查等方面发挥着重要作用。与双抗体夹心法类似，它也具有较高的灵敏度和特异性，能够准确检测出样本中的抗体。由于检测的是总抗体，在某些情况下，这一特点可以快速判断样本中是否存在抗体，无需区分抗体的具体种类。然而，当需要对抗体亚型进行区分时，这一特点则可能成为限制因素。
三、双抗体夹心法与双抗原夹心法的优缺点
1、共同优点：两种方法均利用了抗体或抗原的特异性结合，灵敏度高，能够检测到低浓度的目标物；使用两种不同的抗体或抗原，有效降低了非特异性结合，特异性好；信号值和浓度值的比例关系良好，检测曲线宽、线性好，便于定量分析；反应原理简单，操作相对容易，易于在实验室中实施。
2、共同缺点：它们都易受类风湿因子（RF）、异嗜性抗体、人抗动物抗体等干扰物质的影响。为解决这一问题，通常需要加入阻断剂或者对原料进行改造，这无疑增加了检测成本。当使用夹心法检测抗体时，只能检测样本中的总抗体，无法对抗体的种类进行区分。
在免疫测定夹心法的应用过程中，优质的原料是确保检测准确性和可靠性的关键。湖北新德晟材料科技有限公司专注于体外诊断试剂原料的研发与生产，为双抗体夹心法和双抗原夹心法提供了高品质的原料支持。凭借卓越的产品质量和专业的技术服务，湖北新德晟成为众多实验室和企业在免疫测定领域值得信赖的合作伙伴。如果您有采购需要，欢迎随时联系！