细胞裂解液是以去污剂为基础、针对细胞裂解应用、成分优化的缓冲液和试剂。对于不同细胞类型、蛋白定位、以及下游应用，需要不同的细胞裂解液进行有效的细胞裂解和蛋白提取。
去污剂主要类型及其作用
根据去污剂类型、蛋白定位、及目的蛋白性质来确定细胞裂解液的种类。
去污剂主要类型及其作用
类型 |
带电情况 |
作用 |
应用 |
举例 |
离子型
(变性去污剂)
带电荷的
阴离子性或阳离子性的
破坏蛋白活性、功能及蛋白间相互作用力
总蛋白提取
SDS-PAGE
SDS
ETMAB
非离子型
(非变性去污剂)
不带电荷
较少破坏活性及功能，可维持蛋白间作用力
酶学检测
免疫检测
Triton X-100
Tween 20
NP-40
两性离子型
具有正电荷和负电荷的基团
但净电荷为零
兼具离子型和非离子型去污剂的特点，能破坏蛋白质间相互作用
CHAPS
CHAPSO
根据蛋白定位不同推荐的裂解液种类
常用细胞裂解液
#RIPA缓冲液
最初以其开发的测定方法(放射免疫沉淀测定法)来命名，是两种离子去污剂和一种非离子去污剂的Tris缓冲液,也是哺乳动物细胞或软组织裂解和蛋白提取的常用选择。
常用配方：
25 mM Tris-HCl, pH 7.6
150 mM NaCl
1% NP-40
1%去氧胆酸钠
0.1%十二烷基硫酸钠(SDS)
兼容应用：
BCA及去污剂兼容型的Bradford试剂蛋白浓度测定、SDS-PAGE、蛋白质免疫印迹、ELISA及纯化等。
#IP缓冲液
是一种修饰型的RIPA缓冲液（不含SDS），可有效溶解细胞蛋白，但无法释放基因组DNA或破坏蛋白复合物，可兼容下游的免疫沉淀或者亲和吸附的应用。
常用配方：
25 mM Tris-HCl, pH 7.4
150 mM NaCl
1% NP-40
1% mM EDTA
5% 甘油
兼容应用：
BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀及报告基因检测。
#NP-40缓冲液
NP-40是一种非离子型聚氧乙烯表面活性剂，常作为细胞裂解缓冲液或其他用于提取和溶解蛋白质的溶液的组分。
常用配方：
150mM NaCl
1.0% NP-40
50mM Tris-HCl，pH值8.0
兼容应用：
BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀。
#Tris-Triton缓冲液
非离子型表面活性剂，常用作细胞裂解缓冲液或其他用于提取和溶解蛋白质的溶液。Trition X-100效果介于NP-40和SDS之间。
常用配方：
10mM 三羟甲基氨基甲烷(Tris)，pH值7.4
100mM NaCl
1mM EDTA
1mM EGTA
1% Triton X-100
10% 甘油
0.1% SDS
0.5% 去氧胆酸钠
兼容应用：
BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀。
产品列表
产品号 |
产品名称 |
规格 |
Cas |
包装 |
氯化钠
用于细胞和昆虫细胞培养,≥99.5%(T)
7647-14-5
500g,2.5kg
NP-40
~10% in H2O
9016-45-9
25ml,100ml,
500ml,5L
Triton X-100
生化试剂级
9002-93-1
100ml,500ml,1L,4L
三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐(Tris HCl)
用于分子生物学和细胞培养,≥99.0%(AT)
1185-53-1
100g,500g
脱氧胆酸钠
98%
302-95-4
25g,100g,
250g,500g
十二烷基硫酸钠(SDS)
分子生物学级,≥98.5% (GC)
151-21-3
25g,100g,
500g
三(羟甲基)氨基甲烷(Tris）
细胞培养级,≥99.9%(T)
77-86-1
5kg
乙二胺四乙酸(EDTA)
99%,用于细胞培养
60-00-4
100g,500g
3,6-二氧杂-1,8-辛二胺四乙酸（EGTA）
用于分子生物学,≥99.0%
67-42-5
25g,100g,
500g
甘油
无菌,for molecular biology, ≥99%
56-81-5
100ml