在双抗体夹心ELISA测定中，样品中存在的IgM与已吸附在聚苯乙烯微量滴定池表面的抗IgM抗体反应。在通过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）缀合的抗IgM抗体。这些酶标记的抗体与先前结合的IgM形成复合物。在另一个洗涤步骤之后，通过添加无色底物3，3’，5，5’-四甲基联苯胺（TMB）来测定与免疫吸附结合的酶。结合酶的数量与所测试样品中IgM的浓度直接相关；因此，在450nm处的吸光度是测试样品中IgM浓度的测量值。试验样品中IgM的量可以根据标准曲线进行插值，并根据样品稀释度进行校正。
艾美捷BGT-IgM (鸡) ELISA Kit：
货号：BGT-KET-131
抗体类型：酶联免疫吸附测定（ELISA）
宿主：山羊
特异性/靶标：免疫球蛋白M（IgM）
规格：1.0
检测范围：3.125 ng/ml - 200 ng/ml
灵敏度：0.979 ng/ml
测定时间：70 分钟
样本类型：血浆、血清
储存条件：2-8°C
IgM检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法（ELISA），用于测量鸡生物样品中的IgM。如果ELISA在预期用途之外使用，用户可能需要优化saiduse。
样品收集和处理：
所有血液组分和生物材料应被视为潜在的危险物质。在处理和处置时，应遵循通用预防措施。如果血样出现凝血、严重溶血、脂血，或者样本的完整性受到质疑，请做好记录并谨慎解释结果。下面列出的样品收集和储存条件是一般性指导。尚未评估样本的稳定性。
血清样本 - 应通过静脉穿刺采集血液。血液凝固后，应通过离心分离血清。取出血清并立即检测，或分装样本并储存在-80°C或-20°C。避免反复冻融。
血浆样本 - 应将血液收集到含有抗凝剂的容器中，然后进行离心。立即检测或分装样本并储存在-80°C或-20°C。避免反复冻融。
尿液样本 - 使用无菌或干净的尿液收集器收集中段尿。离心以去除细胞碎片。立即检测或分装样本并储存在-80°C或-20°C。避免反复冻融。
已知干扰物质 - 浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。
样品稀释：
在使用前，该检测要求每个待测样本都要进行稀释。每次进行检测时，所有样本都应以双份进行检测。推荐的稀释度仅供参考。稀释度应基于未知样本的预期浓度，以便稀释后的样本落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样本水平，在运行整个板之前，强烈建议对一个或两个代表性样本进行系列稀释。
血清样本 - 推荐的起始稀释度为1/2,000。要准备1/2,000的样本稀释液，将5微升的样本转移到495微升的1X稀释液中。这将得到1/100的稀释度。接下来，通过将20微升的1/100稀释液转移到380微升的1X稀释液中来稀释1/100，这将得到1/2,000的稀释度。每个阶段都要彻底混合。
血浆样本 - 推荐的起始稀释度为1/2,000。要准备1/2,000的样本稀释液，将5微升的样本转移到495微升的1X稀释液中。这将得到1/100的稀释度。接下来，通过将20微升的1/100稀释液转移到380微升的1X稀释液中来稀释1/100，这将得到1/2,000的稀释度。每个阶段都要彻底混合。
试剂准备：
使用前将所有试剂预热至室温（16°C至25°C）。
稀释液浓缩液 提供的稀释液溶液是5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1份缓冲液浓缩液，4份dH2O）稀释1/5。
洗涤液浓缩液 提供的洗涤液是20倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1份缓冲液浓缩液，19份dH2O）稀释1/20。如果储存温度较低，浓缩液中可能会形成晶体。在稀释前将浓缩液加热至30-35°C可以溶解晶体。
酶-抗体结合物 通过向990微升1X稀释液中添加10微升酶-抗体结合物来计算每个微孔板测试条所需的工作结合物溶液量。使用前立即稀释，并避光保存。均匀混合，但要轻柔。避免产生泡沫。
预包被的ELISA微孔板 按提供的状态使用即可。打开铝箔袋，从袋中取出板。取出在检测中不会使用的条和孔，放回袋中并重新密封，同时放回干燥剂。
鸡IgM校准物 根据批次特定的分析证书进行准备。