TET家族的5mC羟化酶包括TET1、TET2和TET3。这些TET蛋白可能通过结合到富含CpG的区域来防止不必要的DNA甲基转移酶活性，并通过羟化酶活性将5mC转化为5hmC，进而转化为5-羧基胞嘧啶（5-caC），从而促进DNA去甲基化。研究表明，基因组5hmC水平与TET羟化酶活性相关。此外，TET1在胚胎干细胞中通过结合不同靶基因显示出转录激活和抑制的双重功能。TET1也是急性髓性白血病中MLL基因的融合伴侣，被认为是一种癌蛋白。TET2在白血病中经常发生突变，被认为具有肿瘤抑制作用。TET3已被证明在哺乳动物合子中的DNA甲基化重编程过程中发挥独特作用。因此，在癌症诊断和开发新的基于靶点的癌症治疗中，激活肿瘤抑制因子TET酶如TET2或抑制癌蛋白TET酶如TET1将是重要的。然而，目前检测使用核提取物和纯化酶的TET羟化酶活性/抑制的方法很少。为了解决这个问题，EpigenTek开发并提供了Epigenase™ 5mC羟化酶TET活性/抑制检测试剂盒（比色法）。
5mC-羟化酶TET活性/抑制分析试剂盒用途：
适用于使用核提取物或从包括哺乳动物、植物、真菌和细菌等多种物种中纯化的TET同种型（TET 1-3）来测量总5mC羟化酶TET酶的活性/抑制。这些样本可以是培养细胞、新鲜和冷冻组织等多种形式，但不限于此。
艾美捷-5mC-羟化酶TET活性/抑制分析试剂盒（#P-3086）组分：
5mC-羟化酶TET活性/抑制分析试剂盒具有以下优点和特性：
比色法检测，步骤简单易跟，方便快速。整个程序可在5小时内完成。
直接测量TET羟化酶活性，通过直接检测TET转化的羟甲基化产物。
创新的试剂盒组合使背景信号极低，使检测简单、准确、可靠和一致。
可以使用细胞/组织提取物和纯化的TET蛋白，这允许检测体内外TET羟化酶抑制剂的抑制效果。
新颖的检测原理实现了高灵敏度。可以检测低至20纳克的纯化TET1羟化酶的活性。
包含羟甲基化标准品，可以量化TET羟化酶的特异性活性。
条形微孔板格式使检测灵活：手动或高通量分析（96个检测）。
原理与操作流程：
在这个检测中，一个甲基化的底物被稳定地包被在微孔板孔中。活性的TET酶与底物结合，将甲基化底物转化为羟甲基化产物。这些由TET转化的羟甲基化产物可以被特定的抗体识别。羟甲基化产物的比率或数量，与酶活性成正比，可以通过在450纳米波长的微孔板分光光度计上读取吸光度来进行比色测量。TET酶的活性反过来与所测量的光密度强度成正比。
5mC-羟化酶TET活性/抑制分析试剂盒运输与储存：
试剂盒分三部分运输：第一部分在常温下运输，第二和第三部分则在4°C的冰冻冰袋中运输。收到后请按以下方法储存：(1) 将TS、HC5、HC7、HC8、辅因子1、辅因子2和辅因子3存放在-20°C的避光环境中；(2) 将WB、HC6、DS和8孔检测条存放在4°C的避光环境中；(3) 将其余组分（TAB、BS和SS）存放在常温的避光环境中。
注意：使用前检查WB 10X洗涤缓冲液是否含有盐类沉淀物。如果有，将其在室温或37°C下加热并摇动缓冲液，直到盐类重新溶解。
如果储存得当，试剂盒的所有组分从发货日期起稳定有效期为6个月。
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https://www.amyjet.com/products/P-3086-48.shtml