Calbiotech-CA19-9 ELISA试剂盒用于癌症抗原的定量测定人血清或血浆中CA19-9浓度。
艾美捷Calbiotech-CA19-9（Cancer antigen 19-9）ELISA Kit：
目录编号 CA238T
产品类型 ELISA
数量 96次测试（12x8易碎条状井）
标准范围 25-600 U/mL
样本体积 25 微升/孔
物种 人类
储存和稳定性 将试剂盒存放在2 - 8°C的环境中。确保微孔板密封在装有干燥剂的干燥袋中。试剂在试剂盒有效期内保持稳定。不要将试剂暴露在热源、阳光或强光下。
CA19-9（Cancer antigen 19-9）ELISA Kit检测原理：
CA19-9elisa试验是一种改良的固相序贯夹心ELISA。将样品和生物素化的单克隆抗体加入涂有链霉抗生物素蛋白的孔中。患者样本中的CA19-9与生物素化捕获抗体结合。生物素化的抗体同时与链霉抗生物素蛋白包被的平板结合。洗涤步骤后，加入抗CA19-9-HRP酶偶联物，在捕获的CA19-9周围形成sa三明治。未结合的抗体被洗掉。加入TMB底物导致蓝色的发展。CA19-9的浓度与显色强度成正比。生成颜色强度与CA19-9浓度相关的标准曲线。
检测程序：
将所有样本和试剂盒试剂放置至室温（20-25°C）并轻轻混合。
1. 在架子上固定所需数量的包被孔。
2. 向相应的孔中分配25 µl的CA19-9标准品、样本和对照品。
3. 向每个孔中分配100 µl的抗CA 19-9-生物素试剂（蓝色溶液）。
4. 在500-600 rpm下彻底混合30秒钟。完全混合非常重要。
5. 在室温下孵育60分钟。
6. 清除所有孔中的液体。用350 µL的1X洗涤缓冲液冲洗每个孔三次。每次冲洗后，将倒置的板子用力拍打在吸收性纸巾或纸巾上以去除残留的液滴。
7. 向每个孔中分配100 µl的抗CA19-9-HRP酶结合物（红色溶液）。
8. 在室温下孵育60分钟。
9. 按照步骤6描述的方法移除内容物并冲洗板子3次。
10. 向每个孔中分配100 µl的TMB溶液。
11. 在室温下孵育15分钟，不要摇动。
12. 通过向每个孔中添加50 µl的终止溶液来停止反应。
13. 在15分钟内使用微孔板吸收光度读数器（使用630nm的参考波长）读取450nm处的吸光度。
计算和结果：
1. 计算每组参考标准、对照和样本的平均吸光度值（A450）。
2. 通过在图表纸上绘制每个参考标准的平均吸光度与其浓度（以U/ml为单位）的图表，构建标准曲线，使用最佳拟合二次曲线在线性图表纸上绘制，吸光度在垂直（y）轴上，浓度在水平（x）轴上。
3. 使用每个样本的平均吸光度值，从标准曲线上确定相应的CA19-9浓度（以U/ml为单位）。
标准曲线示例：
典型的标准运行结果，以450nm处的光密度读数在Y轴上显示，对应于X轴上显示的CA19-9浓度。此标准曲线仅供示例，不应用于计算未知数。每个用户应在每次实验中获取自己的数据和标准曲线。
CA19-9（Cancer antigen 19-9）ELISA Kit文献参考：
Glenn, J., Steinberg, W.M., Kurtzman, S.H., et at. Evaluation of the utility of a radioimmunoassay for serum CA 19-9 level in patients before and after treatment of carcinoma of the pancreas. J. Clin. Oncol. 1988; 6:462-8.
Hayakawa, T., Kondo, T., Shibata, T. et al. Sensitive serum markers for detecting pancreatic cancer. Cancer 1988; 61:1827-31.
Koprowski, H., Herly, M., Steplewski, Z., et al. Specific antigen in serum of patients with colon carcinoma. Science 1981; 212:53-5
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