A-72 Cells(赠送Str鉴定报告)|犬癌细胞

"A-72 Cells(赠送Str鉴定报告)|犬癌细胞

细胞背景资料：癌细胞；金毛猎犬

细胞形态：上皮细胞样

接收细胞相关问题：如不能在收到细胞后及时操作细胞，T２５及离心管发货的细胞将可以消毒后在３７度过夜，血清发货的细胞在室温下静置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升华，请即刻复苏细胞。T２５瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境，同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁，此步骤非常必要。T２５瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞，可以收集上清后离心(１２００rpm，５min)后，将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中，由于不断震荡及环境不适，可能导致细胞破碎死亡，从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下，平衡后，贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可；悬浮细胞可以离心(１０００rpm，３min)收集细胞，并用PBS重悬后再离心一次，再用新的培养基重悬并接种细胞。

细胞生长：贴壁

HF-91细胞类似产品：：TE-7细胞、10T1/2细胞、Ramos-RA1细胞

JEKO细胞类似产品：：H-520细胞、NCIH1975细胞、33604细胞

LUDLU 1细胞类似产品：：HCC9204细胞、CCD841CoTr细胞、NPC-TW-039细胞

Mino细胞类似产品：：EoL-1-cell细胞、LM6细胞、RPMI.8226细胞

KYSE-520细胞类似产品：：Bx-PC3细胞、S180细胞、H35细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

P3-X63-Ag8.653细胞类似产品：：IMR 32细胞、SMMC 7721细胞、HCC-15细胞

SF126细胞类似产品：：KMH-2细胞、MCA 205细胞、MKN 7细胞

SUM-149PT细胞类似产品：：AU 565细胞、LIM 1215细胞、HEYA8细胞

Hepa 1-6细胞类似产品：：H-2122细胞、UCH-1细胞、OCM1细胞

KRC-Y细胞类似产品：：Human Foreskin Fibroblast细胞、EAC细胞、Y3M细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

PA I细胞类似产品：：GM00637H细胞、P3J.HR1K细胞、EU-2细胞

CCD1112Sk细胞类似产品：：NB1RGB细胞、BL6细胞、MV-4:11细胞

SKO-007细胞类似产品：：HCC1833细胞、NBL-5细胞、HKBML细胞

NIH-OVCAR-3细胞类似产品：：251 MG细胞、Mono-Mac-6细胞、High-5细胞

OCI-Ly 7细胞类似产品：：H220细胞、253J-BV细胞、Tsup-1细胞

C-32细胞类似产品：：EST81细胞、Cloudman M3细胞、UK Pan-1细胞

细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提GAO血清浓度(ZuiGAO不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。

贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！

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Leydig细胞类似产品：：CTSC-3细胞、BPH-1细胞、MC3T3-L1细胞

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细胞类似产品：：NCIH1299细胞、SUP-B15细胞、C6细胞

COLO206F细胞类似产品：：TC7细胞、INS1细胞、MonoMac6细胞

Michigan Cancer Foundation-12F细胞类似产品：：HBL 100细胞、HRCEC细胞、WM-2664细胞

NCI-H1954细胞类似产品：：TE13细胞、HUT-226细胞、PCI:SG-231细胞

DMS-79细胞类似产品：：U031细胞、751-NA细胞、NCI-H157细胞

DHL4细胞类似产品：：IALM细胞、HEK293-FT细胞、H-82细胞

H2135细胞类似产品：：HCC-1143细胞、MDA436细胞、ARO81细胞

CEMO-1细胞类似产品：：COR-L279细胞、Gerner 7666细胞、H2195细胞

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