NUGC-4 Cells(赠送Str鉴定报告)|人胃癌细胞

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细胞背景资料：胃癌；女性

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在GAO压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，３７度孵箱培养２-３天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO２孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠GAO盐液体,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(２月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加３u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。

细胞生长：贴壁

GM01232细胞类似产品：：Tu212细胞、32D.3细胞、J82 COT细胞

HCCLM6细胞类似产品：：LM3细胞、639 V细胞、Capan 2细胞

COLO 684细胞类似产品：：NCI-SNU-620细胞、AtT-20细胞、SKMEL2细胞

HGF-1细胞类似产品：：PAN 02细胞、SNU-869细胞、JIMT-1细胞

QBC939细胞类似产品：：HRA-19细胞、TE9细胞、C518细胞

NUGC-4 Cells(赠送Str鉴定报告)|人胃癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

PLA801D细胞类似产品：：P388-D1细胞、LU-65M细胞、LTEP-a-2细胞

Dysplastic Oral Keratinocyte细胞类似产品：：ACC2细胞、SK-RC-42细胞、SKMEL1细胞

KE37细胞类似产品：：H2107细胞、J111细胞、M14细胞

HEC1-B细胞类似产品：：HConEpic细胞、HT 1376.T细胞、GDM-1细胞

IOSE 80细胞类似产品：：H2330细胞、NALM-6细胞、FHC细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

NUGC-4 Cells(赠送Str鉴定报告)|人胃癌细胞

细胞生长特性：半贴壁

SW 13细胞类似产品：：CCD18Co细胞、UMUC-14细胞、CAOV4细胞

HDMEC细胞类似产品：：Hs895.T细胞、GLC-82细胞、Karpas 422细胞

Cloudman M3细胞类似产品：：Dami细胞、Hs600T细胞、H1650细胞

GM04671细胞类似产品：：HONE-1细胞、Karpas-299细胞、H735细胞

NCI-H1838细胞类似产品：：A3细胞、Strain V细胞、B16细胞

NCI-H1734细胞类似产品：：IEC-6细胞、SKO-007细胞、RPE1细胞

造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中Zui常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】１)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌３０min,酒精擦拭后直接开始试验；２)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；３)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；４)不带手套，徒手操作；５)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需１２１°CGAO压灭菌２０分钟后３７％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不HAO，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且HAO几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求GAO，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！

正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存HAO了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至７０%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择Zui合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：５-１０% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；５-１５%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在５０%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长２４小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记HAO细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过１.５ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以Zui快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤ZuiHAO使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做HAO记录是非常非常重要的！还有一个Zui重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做HAO防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。

Y3-Ag 1.2.3细胞类似产品：：0V-1063细胞、DU_145细胞、ECC-10细胞

Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞类似产品：：SK-MES1细胞、P3.653细胞、Human Embryonic Skin细胞

MCA205细胞类似产品：：JB-6细胞、COLO 320DM细胞、293c18细胞

MDA453细胞类似产品：：EMT-6细胞、CEM clone 7细胞、P3/X63-Ag8细胞

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SPDC-CCL141细胞类似产品：：CCC-HEH-2细胞、CHP-126细胞、LTEP a2细胞

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H1105细胞类似产品：：CHP 126细胞、SW579细胞、D-324MED细胞

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CMK细胞类似产品：：LS-411细胞、CV-1细胞、NCI-H128细胞

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Fortner's melanotic melanoma #3细胞类似产品：：C4I细胞、AR4-IP细胞、NCI-H2347细胞

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SCCVII/St细胞类似产品：：Panc-327细胞、LNCaP-ATCC细胞、LS 180细胞

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SH-SY5Y Parental细胞类似产品：：KYSE-70细胞、YD38细胞、Calu6细胞

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MB-49细胞类似产品：：HT29细胞、KOPN-8细胞、UC-3细胞

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SK-N-SH细胞类似产品：：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞、DMS-79细胞、STC-1细胞

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NUGC-4 Cells(赠送Str鉴定报告)|人胃癌细胞

Chang Cells细胞类似产品：：Z138细胞、G-361细胞、KYSE450细胞

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