ACC-2 Cells(赠送Str鉴定报告)|人涎腺腺样囊性癌细胞

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细胞背景资料：涎腺腺样囊性癌；男性

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在GAO压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，３７度孵箱培养２-３天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO２孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠GAO盐液体,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(２月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加３u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。

细胞生长：贴壁

Z138细胞类似产品：：NCI-H520细胞、HeLa 229细胞、KATOIII细胞

Ramos-RA1细胞类似产品：：H-740细胞、H2052_MM细胞、870细胞

Melanoma 14细胞类似产品：：T. T细胞、NSC-34细胞、OVCAR5细胞

L1210细胞类似产品：：HCA-7细胞、SVG p12细胞、TE9细胞

Y3-Ag 1.2.3细胞类似产品：：0V-1063细胞、DU_145细胞、ECC-10细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

NP-69细胞类似产品：：H-4-II-E细胞、Huh7.5细胞、NCIH1105细胞

CCD18细胞类似产品：：T-98G细胞、IM9细胞、NCI-H2110细胞

HAVSMC细胞类似产品：：HCC95细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞、Colon-38细胞

CEMO-1细胞类似产品：：HCC-1395细胞、MADB 106细胞、NUGC-3细胞

NCI-H1568细胞类似产品：：MC26细胞、H2030细胞、D-283 Med细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

Hs 737.T细胞类似产品：：293 F细胞、BT细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞

H1568细胞类似产品：：MSTO-211细胞、NCIH1694细胞、H-676细胞

SRA 01/04细胞类似产品：：HN4细胞、CEM-0细胞、MC38细胞

PF382细胞类似产品：：FRTL-5 Cl 2细胞、RWPE1细胞、PC 61 5.3细胞

SKNO-1细胞类似产品：：HEC-151细胞、IEC-18细胞、C32 [Human melanoma]细胞

ADR-RES细胞类似产品：：SG231细胞、B-16细胞、Hs600T细胞

购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过GAO或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。

正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存HAO了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至７０%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择Zui合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：５-１０% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；５-１５%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在５０%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长２４小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记HAO细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过１.５ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以Zui快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤ZuiHAO使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做HAO记录是非常非常重要的！还有一个Zui重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做HAO防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。

P-815细胞类似产品：：P3-X63-Ag8细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞、Panc-327细胞

Ca-Ski细胞类似产品：：LIM1215细胞、KPNRTBM1细胞、L-1210细胞

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SK-ES细胞类似产品：：LK 2细胞、Emory University-3细胞、U-138 MG细胞

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GLRK 13细胞类似产品：：IB-RS-2细胞、RCC_7860细胞、67NR细胞

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Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞类似产品：：NCIH2107细胞、NCI-H1581细胞、NFS-60细胞

PC3M-1E8细胞类似产品：：CEMx721.174.T2细胞、MC3T3-E1 Subclone 4细胞、Hs839.T细胞

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LN 382细胞类似产品：：SK-N-FI细胞、T98G细胞、HuNS1细胞

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NCIH2122细胞类似产品：：LN-382细胞、OVTOKO细胞、NCIH1581细胞

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G401细胞类似产品：：PaTu-8988s细胞、GM03571细胞、H322细胞

MonoMac1细胞类似产品：：HSC-3细胞、95C细胞、C38细胞

NB-4细胞类似产品：：NCI-HUT-125细胞、HCC-1438细胞、HT clone H9细胞

H441细胞类似产品：：HHL5细胞、H748细胞、MNNG/HOS Clone F-5细胞

FRO81-2细胞类似产品：：RIN-m细胞、SW1088细胞、NCI-H196细胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞类似产品：：AGS细胞、P388.D1细胞、P3X63 AG8-653细胞

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Tb 1 Lu (NBL-12)细胞类似产品：：VMM-5A细胞、SU-DHL-2细胞、RASMCs细胞

SCLC-21H细胞类似产品：：SPCA-1细胞、NCIH2107细胞、231-luc细胞

SKG-IIIa细胞类似产品：：IOSE80细胞、BC-019细胞、H-2196细胞

HRIF细胞类似产品：：CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞

Clone Y-1细胞类似产品：：C-Lu65细胞、H1666_DA细胞、CCLP1细胞

BDCM细胞类似产品：：OCI/AML2细胞、Plaepi 34细胞、SUIT-2细胞

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MV 4;11细胞类似产品：：KYSE 140细胞、CV-1.K细胞、RAW2647细胞

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CWR22R细胞类似产品：：EAhy926细胞、A72细胞、SK_N_BE2C细胞

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RINm5F细胞类似产品：：AMO1细胞、U138MG细胞、SKHEP-1细胞

159PT细胞类似产品：：NCI-H2122细胞、SuDHL 8细胞、CCD-1112sk细胞

NW38细胞类似产品：：H1648细胞、MDA MB 361细胞、NTERA2-D1细胞

SHZ-88细胞类似产品：：PF382细胞、NCIH1648细胞、Metastatic Variant 522细胞

HEP3B2细胞类似产品：：Hos TE-85细胞、H647细胞、HMSC细胞

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HBE 135-E6/E7细胞类似产品：：FHL-124细胞、SCC 9细胞、HPMC细胞

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NCI H295R细胞类似产品：：NCI-H1092细胞、RERFLCMS细胞、SUIT2细胞

ZYM-DIEC02细胞类似产品：：HPaSteC(HPSC)细胞、RPPVEC细胞、NL20SV细胞

Centre Antoine Lacassagne-62细胞类似产品：：MESSA细胞、IHC-ST1细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞

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MV411细胞类似产品：：SCC7细胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞、PFSK细胞

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bEND.3细胞类似产品：：ATDC5细胞、KP-N-NS细胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞

BC-021细胞类似产品：：Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞、BRL细胞、MDA-MB 453细胞

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ACC-2 Cells(赠送Str鉴定报告)|人涎腺腺样囊性癌细胞

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