HAC-84 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：贴壁

HCC-1569细胞类似产品：：WSUDLCL2细胞、AN3 CA细胞、Hs606T细胞

HRMC细胞类似产品：：Institute for Medical Research-90细胞、3T3-Swiss细胞、Hs852T细胞

CAL851细胞类似产品：：CPA 47细胞、SNU216细胞、hTERT-RPE-1细胞

Madin-Darby Bovine Kidney细胞类似产品：：C3H/10T1/2细胞、WM 239-A细胞、U-266 AR1细胞

Tb 1-Lu细胞类似产品：：BNL-HCC细胞、NCIH1688细胞、GM07404D细胞

HAC-84 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做HAO标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

NCI-UMC-11细胞类似产品：：WM-115细胞、H1623细胞、NK-92 MI细胞

KTC1细胞类似产品：：VMM39细胞、3T3 Swiss Albino细胞、HCC-94细胞

A673细胞类似产品：：MKN1细胞、SHI-1细胞、UCW 100细胞

BHP 10-3细胞类似产品：：W133细胞、Jurkat clone A3细胞、RPMI 1788细胞

XuanWei Lung Cancer-05细胞类似产品：：GM 2132细胞、MFE 280细胞、R D细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

LO2细胞类似产品：：IOSE 29细胞、NR 8383细胞、Hs 695T细胞

NCI-H1993细胞类似产品：：PTK 1细胞、HuH-6细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞

C4-2 Bone metastatic细胞类似产品：：H-82细胞、SW-527细胞、NBL-7细胞

Human Embryo Lung-1细胞类似产品：：H-1437细胞、SKNBE(1)细胞、TKB-1细胞

MB468细胞类似产品：：Pt-K2细胞、BT325细胞、HEK-293A细胞

PK-13细胞类似产品：：PG-BE1细胞、NCI H747细胞、EBNA-293细胞

购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过GAO或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。

细胞培养无菌操作步骤和注意事项：１.打开无菌工作台及净化室的紫外灯，消毒半小时以上。２.进入净化室前先关闭紫外灯，打开超净台风机，等待３０min以上，以排尽臭氧。３.穿HAO隔离衣，戴HAO口罩，帽子。４.风淋２分钟。５.０.１%水泡手，擦干。６.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管，滴管，试管，培养瓶等均事先灭菌。７.打开各类瓶盖前先过火，以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰，镊子使用前应经火焰烧灼。８.水平式风机的超净台，应使瓶口斜置，应尽量避免瓶口敞开直立。９.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系；吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口０.５cm，避免伸入培养瓶口或试管口；以防止细胞系的互相混杂污染。１０.漏在培养瓶上或台上的液体，立即用酒精棉球擦净。１１.操作完毕后恢复工作台面。

HCC1428细胞类似产品：：P-388细胞、CTLL-2细胞、NR8383.1细胞

CHP-212细胞类似产品：：RGM-1细胞、NCl-H157细胞、P3-X63-Ag8-6-5-3细胞

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RL952细胞类似产品：：MV-4:11细胞、IA-LM细胞、Sf-21细胞

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SK Col 1细胞类似产品：：KOSC-2细胞、NCIH2228细胞、NCI H929细胞

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ZR751细胞类似产品：：PK (15)细胞、DI TNC1细胞、CHP-212细胞

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293E细胞类似产品：：INS-1E细胞、LS 174 T细胞、SHP77细胞

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Colon 38细胞类似产品：：SKMEL-31细胞、Ls-174-T细胞、SkMel31细胞

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Hs 746.T细胞类似产品：：SK_N_BE2C细胞、U87 MG细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞

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SW-756细胞类似产品：：CD-18细胞、H250细胞、PTK2细胞

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H1184细胞类似产品：：OV-CA 432细胞、KCL22S细胞、YAC细胞

HCO细胞类似产品：：SNU368细胞、HCV-29细胞、OVCAR 433细胞

MGECs细胞类似产品：：SKBR-3细胞、SNU-668细胞、Jurkat E6细胞

NBL-3细胞类似产品：：RL952细胞、C4-1细胞、HCC0044细胞

EA. hy 926细胞类似产品：：P3/ag细胞、TC-1 [Mouse lung]细胞、CMECs细胞

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