3T3-J2 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠胚胎成纤维细胞

"3T3-J2 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠胚胎成纤维细胞

细胞背景资料：胚胎；成纤维细胞

细胞形态：成纤维细胞样

【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在GAO压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，３７度孵箱培养２-３天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO２孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠GAO盐液体,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(２月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加３u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。

细胞生长：贴壁

NCI-H838细胞类似产品：：hTERT-RPE-1细胞、R1610细胞、Okayama University Medical School-23细胞

IMCD-3细胞类似产品：：NCI-H2009细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞、LIM 1215细胞

MADB 106细胞类似产品：：HCT FET细胞、KMS18细胞、KMS18细胞

HCC366细胞类似产品：：L-363细胞、KYSE70细胞、GM00637H细胞

LL/2 (LLC1)细胞类似产品：：HeLa229细胞、ROS 17/2.8细胞、LAN6细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

UMUC1细胞类似产品：：HLE细胞、HFL-1细胞、H-2029细胞

Walker/LLC-WRC 256细胞类似产品：：GM05384细胞、Panc8.13细胞、HCT 8细胞

PNT1A细胞类似产品：：RPE-1细胞、HCCLM6细胞、HLEC-SRA 01/04细胞

HT 1376.T细胞类似产品：：U138细胞、hADSCs细胞、OVCA432细胞

SUM 159PT细胞类似产品：：GM02132细胞、TE-5细胞、P3-X63Ag8.653细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

MDAMB361细胞类似产品：：HuH-6细胞、SW1783细胞、HT1080细胞

LNCaP.FGC细胞类似产品：：NB-19细胞、B10BR细胞、SW-1417细胞

WM 266-4细胞类似产品：：CMT 167细胞、SNU484细胞、CTLL-2细胞

MC3T3细胞类似产品：：P3-NS1/1-Ag4-1细胞、Panc 02细胞、COLO 201细胞

hCMEC/D3细胞类似产品：：SACC-83细胞、EBTr细胞、MN9D细胞

SUM149细胞类似产品：：KBM7细胞、PA317细胞、SP-2/0-AG14细胞

培养细胞真的不难，Zui关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越HAO。另外，要掌握HAO胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，Zui近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做HAO支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候ZuiHAO给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。

正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存HAO了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至７０%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择Zui合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：５-１０% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；５-１５%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在５０%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长２４小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记HAO细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过１.５ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以Zui快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤ZuiHAO使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做HAO记录是非常非常重要的！还有一个Zui重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做HAO防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。

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NCI-H522细胞类似产品：：SJCRH30细胞、RIN-m 14B细胞、H2170细胞

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SkMel31细胞类似产品：：CWR22R-V1细胞、LS-174细胞、32D:cl3细胞

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NMCG1细胞类似产品：：HBVSMC细胞、SaOS-2细胞、HEK-EBNA细胞

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NU-GC-4细胞类似产品：：TK-1细胞、Ramos G6.C10细胞、BERH-2细胞

Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞类似产品：：451Lu细胞、BNL CL.2细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞

MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞类似产品：：SHP-77细胞、JF305细胞、SKMEL28细胞

PaTu-8988s细胞类似产品：：8305-C细胞、EBC-1/original细胞、SCC154细胞

VM Cub 1细胞类似产品：：INS1E细胞、HLEpiC细胞、22Rv1细胞

Beta-TC-6细胞类似产品：：HEK 293-F细胞、2T细胞、OCI-Ly10细胞

LS180细胞类似产品：：SW982细胞、MDA-MB453细胞、Hs 294T细胞

SUM149-PT细胞类似产品：：MHCC-LM3细胞、Vero E-6细胞、NOMO-1细胞

TT细胞类似产品：：IEC 6细胞、no.11细胞、GM04154B细胞

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NCIH441细胞类似产品：：ASH-3细胞、HPDE6c7细胞、HEL9217细胞

Wistar Institute, Susan Hayflick细胞类似产品：：HEK293-EBNA1细胞、CT26细胞、HEL-92_1_7细胞

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